体外条件下人骨髓间充质干细胞与NZBW F1鼠T淋巴细胞的免疫调节

背景：近年研究发现系统性红斑狼疮患者的间充质干细胞存在异常，自体造血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮复发率高，有学者提出系统性红斑狼疮不仅是造血干细胞病，也是间质干细胞病。 目的：探讨人骨髓间充质干细胞在体外对NZBW F1鼠脾脏T淋巴细胞的免疫调节作用。 设计、时间及地点：细胞共培养体外实验，于2008-03/09在江苏大学附属医院中心实验室完成。 材料：健康人骨髓由江苏大学附属医院研究生自愿捐献。SPF级20周龄NZBW F1雌鼠9只，购自南京大学动物模式研究所。 方法：Percoll密度梯度离心法分离培养人骨髓间充质干细胞，取P3代细胞用于实验。20周龄NZBW F1小鼠适应性饲养至24周龄时，无菌分离脾淋巴细胞，在刀豆球蛋白A刺激下，将T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞分别以不同比例(1∶0.01，1∶0.02，1∶0.1)共培养72 h，并设立对照组。 主要观察指标：MTT法检测T淋巴细胞增殖，流式细胞仪检测T淋巴细胞凋亡和CD69，CD28表达，实时荧光定量PCR检测T淋巴细胞白细胞介素10、干扰素γ mRNA水平。 结果：与对照组比较，在体外人骨髓间充质干细胞能抑制NZBW F1鼠T淋巴细胞的增殖，且呈剂量依赖性(P < 0.05)。与对照组比较，T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞比例为1∶0.02和1∶0.1时，骨髓间充质干细胞可抑制T淋巴细胞的凋亡，并促进T淋巴细胞干扰素γ mRNA表达，抑制白细胞介素10 mRNA表达；T淋巴细胞与骨髓间充质干细胞比例为1∶0.01时，T淋巴细胞凋亡情况和干扰素γ、白细胞介素10 mRNA表达无明显差异(P > 0.05)。 结论：人骨髓间充质干细胞体外在一定比例下可能通过抑制NZBW F1鼠T淋巴细胞的增殖和凋亡、干预Th1/Th2细胞因子mRNA表达，继而下调T淋巴细胞的免疫功能。

Immunoregulation effects of bone marrow mesenchymal stem cells on splenic T-lymphocytes in NZBW F1 mice in vitro