自噬和蛋白酶体降解途径在突变型α-突触核蛋白PC12细胞凋亡中的作用 |
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引用本文: | 杨昉,杨亚萍,曹碧茵,毛成洁,蔡增林,王芬,石际俊,刘春风.自噬和蛋白酶体降解途径在突变型α-突触核蛋白PC12细胞凋亡中的作用[J].中华神经科杂志,2009,42(4). |
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作者姓名: | 杨昉 杨亚萍 曹碧茵 毛成洁 蔡增林 王芬 石际俊 刘春风 |
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作者单位: | 1. 苏州大学附属第二医院神经内科,215004 2. 苏州大学衰老与神经疾病实验室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,江苏省高校自然科学基金,苏州大学高校省级重点实验室开放课题 |
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摘 要: | 目的 利用建立好的转染A53T突变型α-突触核蛋白的大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞株,探讨自噬和泛素-蛋白酶体通路在细胞凋亡途径中的具体作用.方法 选择特异性蛋白酶体抑制剂和大自噬抑制剂及诱导剂作用于稳定转染的A53T细胞株,四甲基偶氮唑盐法和流式细胞仪检测细胞活力和各组细胞凋亡率,电镜观察超微结构,并测定细胞培养液中NO的活力和热休克蛋白70(Hsp70)及Caspase-3蛋白表达.结果 蛋白酶体抑制剂环氧霉素(100 nmol/L)和(或)大自噬抑制剂3-MA(10 mmol/L)处理A53T细胞24 h后环氧霉素组、3-MA组和环氧霉素+3-MA组细胞活力(A值分别为0.23±0.01、0.19±0.01、0.17±0.01)较对照A53T细胞组(A值为0.32±0.06)明显下降(P<0.05);而大自噬诱导剂雷帕霉素(0.2 μg/ml)处理后细胞存活率(A值为0.44±0.08)显著高于其余用药组.与对照组(1.55%±1.15%)相比,3-MA、环氧霉素、环氧霉素+3-MA组作用24 h后A53T细胞的凋亡百分率(分别为4.74%±0.91%、4.59%±1.18%、5.40%±1.75%)显著增高(P<0.05),而大自噬诱导剂下调蛋白酶体抑制剂导致的凋亡;蛋白酶体抑制剂组NO和Hsp70蛋白含量也明显高于对照组.结论 大自噬和蛋白酶体途径障碍促进了凋亡发生,抑制或诱导自噬对Hsp70和NO的影响不如蛋白酶体途径对其影响大.
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关 键 词: | 帕金森病 α突触核蛋白 自噬 蛋白酶体内肽酶复合物 细胞凋亡 |
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