| 含有RSV G蛋白片段和CTL表位融合蛋白的表达及纯化 |
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| 引用本文： | 龚伟,范昌发,曾瑞红,梅兴国.含有RSV G蛋白片段和CTL表位融合蛋白的表达及纯化[J].军事医学科学院院刊,2005,29(2):120-123. |
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| 作者姓名： | 龚伟 范昌发 曾瑞红 梅兴国 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850 |
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| 摘 要： | 目的：构建表达呼吸道合胞病毒(RSV)G蛋白片段(G126，来自100-225氨基酸)和来自：RSVM2蛋白的CTL表位的原核表达质粒，探索适宜的表达和纯化条件，获得融合表达产物，为进行体内外实验检测奠定基础。方法：利用PCR技术，从质粒puC18(G10)、puC18(CTL)中扩增G126和CTL基因，通过DNA重组技术构建含：DsbAG126-Linker-CTL(DsbA-GLC)融合基因的表达载体pET(GLC)。转化宿主菌E.coli BL21(DE3)plysS进行诱导表达，并采用亲和层析纯化目的蛋白。结果：DsbA-GLC在E．coli BL21(DE3)plysS中可获得高效表达，表达量可达菌体总蛋白的21％。通过可溶性测试，DsbA-GLC能以可溶性形式表达。纯化后目的蛋白的纯度可达到95％以上。结论：实现RSVG126和M2蛋白CTL表位的融合表达，所获得的重组蛋白可作为抗原用于RSV重组蛋白疫苗的筛选。
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| 关 键 词： | 呼吸道合胞病毒 糖蛋白类 CTL表位 原核表达 蛋白纯化 聚合酶链反应 重组蛋白质类 |
| 文章编号： | 1000-5501(2005)02-0120-04 |
Expression and purification of fusion protein containing segment of glycoprotein G and CTL epitope of protein M2 from RSV |
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| GONG Wei,FAN Chang-fa,ZENG Rui-Hong,MEI Xing-guo.Expression and purification of fusion protein containing segment of glycoprotein G and CTL epitope of protein M2 from RSV[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2005,29(2):120-123. |
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| Authors: | GONG Wei FAN Chang-fa ZENG Rui-Hong MEI Xing-guo |
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| Institution: | GONG Wei,FAN Chang-Fa,ZENG Rui-Hong,MEI Xing-Guo * |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | respiratory syncytial viruses glycoproteins CTL epitope prokaryotic expression protein purification polymerase chain reaction recombinant proteins |
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