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| 耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证 | |
| 引用本文： | 何莎,宋燚,陈苏红,王升启,张五星,周伟,刘琪琦.耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证[J].军事医学科学院院刊,2015(7). |
| 作者姓名： | 何莎 宋燚 陈苏红 王升启 张五星 周伟 刘琪琦 |
| 作者单位： | 1. 河北北方学院研究生部,河北张家口,075000 2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850 3. 解放军309医院,北京,100091 |
| 基金项目： | “艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项资助项目 |
| 摘 要： | 目的：基于基因芯片技术建立一种能快速甄别粪肠球菌、屎肠球菌及万古霉素耐药基因的检测方法。方法根据GenBank中查找的2种常见肠球菌特异性基因序列（ ddl）及万古霉素耐药基因（ vanA，vanB）序列，设计与合成用于检测肠球菌的特异性基因及耐药基因的引物和探针，制备耐万古霉素肠球菌（VRE）检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的特异性基因与耐药基因片段，标记产物与基因芯片上的探针杂交，经清洗、化学发光法显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光法检测条件下，评价芯片的特异性、灵敏性和重复性。结果共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条细菌通用探针、4条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性和重复性，灵敏性可达103 CFU／ml。10例临床分离株样本的芯片检测结果与药敏实验基本一致（8／10）。结论初步建立了检测VRE的基因芯片方法，利用此方法可以甄别2种VRE种类并检测其耐药基因。 |
| 关 键 词： | 万古霉素 肠球菌 粪 万古霉素抗药性 芯片分析技术 耐万古霉素肠球菌 多重PCR 化学发光法 |
Gene chip technique in detection of vancomycin-resistant Enterococcus gene |
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| HE Sha,SONG Yi,CHEN Su-hong,WANG Sheng-qi,ZHANG Wu-xing,ZHOU Wei,LIU Qi-qi.Gene chip technique in detection of vancomycin-resistant Enterococcus gene[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2015(7). | |
| Authors: | HE Sha SONG Yi CHEN Su-hong WANG Sheng-qi ZHANG Wu-xing ZHOU Wei LIU Qi-qi |
| Abstract: | |
| Keywords: | vancomycin Enterococcus faecalis vancomycin resistance microchip analytical procedures vancomycin-resistant Enterococcus multiple PCR chemiluminescence |
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