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| 丙型肝炎病毒NS5A反式激活蛋白7的重组表达及生物信息学分析 | |
| 引用本文： | 李晓光,成军,洪源,张延峰,郑铁龙,王慧芬.丙型肝炎病毒NS5A反式激活蛋白7的重组表达及生物信息学分析[J].解放军医学杂志,2007,32(10):1028-1030. |
| 作者姓名： | 李晓光 成军 洪源 张延峰 郑铁龙 王慧芬 |
| 作者单位： | 1. 解放军总医院研究生队,北京,100853 2. 北京地坛医院传染病研究所 3. 解放军第302医院肝衰竭治疗研究中心 |
| 摘 要： | 目的 构建丙型肝炎病毒NS5A反式激活蛋白7(NS5ATP7)的原核表达载体,诱导其在大肠埃希菌中的表达,并初步探讨其结构与功能.方法 应用逆转录PCR(RT-PCR)技术,以HepG2细胞mRNA为模板,扩增获得NS5ATP7基因片段,连接到pGEM-T载体,酶切鉴定及测序正确后插入至原核表达载体pET-32a( )中,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导以获得NS5ATP7融合蛋白的表达,SDS-PAGE、Western blot免疫印迹分析和证实该融合蛋白表达的特异性,并应用生物信息学方法对该融合蛋白的结构和功能进行预测.结果 利用RT-PCR扩增获得大小为891bp的NS5ATP7基因片段,插入pET-32a( )表达载体,转化BL21宿主菌,经IPTG诱导,成功获得了大小为48kD的目的蛋白,Western blot进一步证实了该蛋白具有特异性免疫反应识别.生物信息学预测结果显示此蛋白富含螺旋结构,为非跨膜蛋白,无信号肽.结论 利用大肠埃希菌BL21成功表达了NS5ATP7融合蛋白,结合生物信息学分析结果,为研究NS5ATP7蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了基础. |
| 关 键 词： | 肝炎病毒 NS5A 反式激活 原核表达 计算生物学 丙型肝炎 病毒 激活蛋白 重组表达 生物信息学分析 hepatitis C virus protein analysis bioinformatics expression 生物学特性 免疫原性 研究 结合 信号肽 跨膜蛋白 螺旋结构 显示 预测结果 识别 |
| 修稿时间： | 2007-05-23 |
Prokaryotic expression and bioinformatics analysis of NS5A transactivating protein 7 of hepatitis C virus |
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| Li Xiaoguang, Cheng Jun, Hong Yuan,et al..Prokaryotic expression and bioinformatics analysis of NS5A transactivating protein 7 of hepatitis C virus[J].Medical Journal of Chinese People's Liberation Army,2007,32(10):1028-1030. | |
| Authors: | Li Xiaoguang Cheng Jun Hong Yuan |
| Institution: | Postgraduate Department, General Hospital of PLA, Beijing 100853, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | hepacivirus NS5A trans-activation prokaryotic expression computational biology |
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