血管紧张素Ⅱ与血管平滑肌细胞中自噬水平的关系及机制研究

目的研究血管紧张素 Ⅱ(Ang Ⅱ)是否能够引起血管平滑肌细胞( VSMC)自噬，探讨其相关作用机制。方法以 VSMC为研究对象，设立组别分别为空白组、 Ang Ⅱ组、自噬抑制剂( 3?MA)组、自噬促进剂雷帕霉素( Rap)组、血管紧张素 Ⅱ(AT1)受体抑制剂( ARB)组、 3?MA+Ang Ⅱ组、 Rap+Ang Ⅱ组、 ARB+Ang Ⅱ组，采用四唑盐( MTT)比色法检测细胞存活率，蛋白质免疫印迹法检测自噬相关蛋白脂化和膜相关蛋白( LC3 Ⅱ)表达的变化，免疫荧光法检测自噬小体数目的变化。结果实验中空白组吸光度为( 0.159±0.001)Ang Ⅱ组吸光度为( 0.151±0.003)，相比空白组，加入 Ang Ⅱ药物对细胞存活率变化不明显，差异无统计学意义(P＞0.05)。蛋白，质免疫印迹结果显示加入 Ang Ⅱ促进 VSMC的 LC3?Ⅱ表达量增多，呈现时间依赖性、浓度依赖性，表明 Ang Ⅱ促进 VSMC自噬发生。 3?MA对 Ang Ⅱ(10-7 mol/L，24 h)引起的 LC?3Ⅱ表达量增多起到抑制作用， Rap对 AngⅡ(10-7 mol/L，24 h)引起的 LC?3Ⅱ表达量增多起到叠加作用。 ARB对 Ang Ⅱ(10-7 mol/L，24 h)引起的 LC?3Ⅱ表达量增多起到抑制作用，表明自噬是由 Ang Ⅱ通过 ATI受体引起的。结论 Ang Ⅱ通过 AT1受体引起血管平滑肌细胞发生自噬。