| 基于报告基因检测的PXR、FXR和LXRα激动剂高通量筛选模型的建立 |
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| 引用本文： | 庄嘉琅,曾行,钟国平,金晶,苟晓丽,毕惠嫦,黄民.基于报告基因检测的PXR、FXR和LXRα激动剂高通量筛选模型的建立[J].中国药理学通报,2015(2):289-293. |
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| 作者姓名： | 庄嘉琅 曾行 钟国平 金晶 苟晓丽 毕惠嫦 黄民 |
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| 作者单位： | 中山大学药学院药物代谢与药动学实验室,广东 广州,510006 |
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| 基金项目： | 广东省新药设计与评价重点实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 目的建立基于报告基因法的高通量筛选细胞模型,用来发现PXR、FXR和LXRα受体激动剂。方法利用Real-time定量PCR方法比较HEK293、Hep G2和LS174T细胞中内源性核受体PXR、FXR和LXRα的表达量,将p SG5-h PXR和p GL3-XREM-CYP3A4、p EGFP-N3-h FXR和EcRETK-Luc、p CMX-FLAG-h LXRα和p GL3-XREM-CYP3A4等质粒分别共转染到工具细胞中,优化共转染比例,并考察阳性药与萤光素酶报告基因表达强度的量效关系、模型特异性和稳定性。结果 1根据Real-time定量PCR结果,模型选用低表达PXR、FXR和LXRα的HEK293细胞作为工具细胞;2根据不同共转染比例对报告基因活性的结果,PXR、FXR和LXRα报告基因药物筛选模型的报告基因和过表达质粒比例,最终分别选择1∶1、2∶1和2∶1;3模型中,报告基因活性均与相应阳性药物(PXR/Rif、FXR/CDCA和LXRα/T0901317)呈剂量依赖性增长;4仅PXR激动剂Rif、FXR激动剂CDCA和LXRα激动剂T0901317可分别明显增加相应筛选模型的报告基因活性,分别重复5次试验后,计算得Z'值分别为0.58、0.66和0.63。结论该研究建立的PXR、FXR和LXRα激动剂高通量筛选模型,具有良好的特异性和稳定性,适用于对PXR、FXR和LXRα受体激动剂的筛选,进而开发以核受体作为药物靶点的药物。
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| 关 键 词： | 核受体 报告基因 高通量筛选 PXR FXR LXRα |
Establishment of cell models for PXR,FXR and LXRαagonists high-throughput screening based on reporter gene assay |
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| ZHUANG Jia-lang,ZENG Hang,ZHONG Guo-ping,JIN Jing,Gou Xiao-li,BI Hui-chang,HUANG Min.Establishment of cell models for PXR,FXR and LXRαagonists high-throughput screening based on reporter gene assay[J].Chinese Pharmacological Bulletin,2015(2):289-293. |
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| Authors: | ZHUANG Jia-lang ZENG Hang ZHONG Guo-ping JIN Jing Gou Xiao-li BI Hui-chang HUANG Min |
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| Institution: | ZHUANG Jia-lang;ZENG Hang;ZHONG Guo-ping;JIN Jing;Gou Xiao-li;BI Hui-chang;HUANG Min;Laboratory of Drug Metabolism and Pharmacokinetics,School of Pharmaceutical Sciences,Sun Yat-Sen University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | nuclear receptor reporter gene high-throughput screening PXR FXR LXRα |
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