| 噬琼胶卵链菌β-琼胶酶基因YM01-5的克隆表达及其酶学性质的研究 |
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| 引用本文： | 安可,史晓翀,崔方元,程景广,刘娜,张晓华.噬琼胶卵链菌β-琼胶酶基因YM01-5的克隆表达及其酶学性质的研究[J].中国海洋药物,2018,37(1):31-39. |
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| 作者姓名： | 安可 史晓翀 崔方元 程景广 刘娜 张晓华 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学 海洋生命学院,中国海洋大学 海洋生命学院,中国海洋大学 海洋生命学院,中国海洋大学 海洋生命学院,中国海洋大学 海洋生命学院,中国海洋大学 海洋生命学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学(41206117)资助 |
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| 摘 要： | 目的 从青岛近海海水中分离鉴定了1株能够降解琼胶的海洋新菌—嗜琼胶卵链菌（Catenovulumagarivoransgen. nov. sp. nov.）YM01T，并对其进行了全基因组测序。本文对该菌的1个β-琼胶酶基因YM01-5进行了克隆表达，并对重组琼胶酶的酶学性质进行了研究。方法 利用镍柱亲和层析对重组琼胶酶进行了分离纯化，采用DNS法测定重组酶的酶学性质，薄层层析(TLC)和质谱(MS)法对AgaYM01-5的酶解产物进行分析。结果 β-琼胶酶基因YM01-5全长2 412 bp，编码803个氨基酸，预测分子量为91.6 kDa，其催化模块属于糖苷水解酶GH50家族。重组琼胶酶YM01-5酶学性质的研究结果表明，该酶的最适温度为40 ℃，最适pH为9.0。在35 ℃以下具有良好的热稳定性，pH 6～10之间保持较高的稳定性，在该范围的pH缓冲液中放置12 h后，YM01-5仍能保持80%以上的酶活力。此外，该重组琼胶酶降解琼脂糖的Km、Vmax值分别为15.6 mg/mL和188 U/mg， 对降解产物的薄层层析及质谱分析结果表明，β-琼胶酶基因YM01-5以外切酶的形式作用于琼脂糖产生新琼二糖作为终产物。结论 该酶降解产物单一，有利于琼胶寡糖的制备，具有较高的工业应用潜力，它的发现也为研究菌株YM01中琼脂糖的代谢通路提供了参考。
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| 关 键 词： | β-琼胶酶YM01-5 克隆表达 酶学性质 新琼二糖 |
| 收稿时间： | 2017/4/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/6/2 0:00:00 |
Cloning, expression, and characterization of beta-agarase YM01-5 from Catenovulum agarivorans YM01T |
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| AN Ke,SHI Xiao-chong,CUI Fang-yuan,CHENG Jing-guang,LIU Na and ZHANG Xiao-hua.Cloning, expression, and characterization of beta-agarase YM01-5 from Catenovulum agarivorans YM01T[J].Chinese Journal of Marine Drugs,2018,37(1):31-39. |
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| Authors: | AN Ke SHI Xiao-chong CUI Fang-yuan CHENG Jing-guang LIU Na and ZHANG Xiao-hua |
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| Institution: | College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,College of Marine Life Sciences,Ocean University of China,College of Marine Life Sciences,Ocean University of China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | beta-agarase YM01-5 Cloning and expression characterization neoagarobiose |
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