| 凝胶过滤色谱和Bradford法测定发酵类抗生素中蛋白残留量 |
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| 引用本文： | 许明哲,马仕洪,胡昌勤.凝胶过滤色谱和Bradford法测定发酵类抗生素中蛋白残留量[J].中国药学,2004,13(4):262-266. |
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| 作者姓名： | 许明哲 马仕洪 胡昌勤 |
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| 作者单位： | 中国药品生物制品检定所 北京100050
(许明哲，马仕洪)，中国药品生物制品检定所 北京100050(胡昌勤) |
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| 摘 要： | 目的以发酵类抗生素盐酸林可霉素为例,建立一个快速、简单、灵敏度高的可用于发酵类抗生素中蛋白残留量控制的方法.方法利用凝胶过滤色谱(GFC)首先将蛋白质与抗生素分离,收集蛋白组分,再利用蛋白检测方法Bradford法(考马氏亮兰染色法)对残留的蛋白进行定量;色谱柱为SuperdexTM Peptide HR 10/30;检测波长为214 nm;流速为1 mL·min-1;流动相为0.01 mol·L-1磷酸盐缓冲液;进样量为500 μL.结果本方法蛋白(BSA)的平均回收率大于90%,蛋白浓度在0-12 μg·mL-1之间符合曲线方程y=-0.002 4x2 0.064 2x 0.002 9,r2＝0.999 9; 检测限为3 ng·mL-1(相当于盐酸林可霉素中蛋白的残留量为7×10-7).结论本方法简便,快速,灵敏,可以用于控制发酵类抗生素中蛋白的残留量.
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| 关 键 词： | 凝胶过滤色谱 Bradford法 残留蛋白 发酵类抗生素 盐酸林可霉素 |
Gel Filtration Chromatography Combined with Bradford Method for Determination of Total Residual Protein in Ferment Antibiotics |
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| XU Ming-Zhe,MA Shi-Hong,HU Chang-qin.Gel Filtration Chromatography Combined with Bradford Method for Determination of Total Residual Protein in Ferment Antibiotics[J].Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences,2004,13(4):262-266. |
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| Authors: | XU Ming-Zhe MA Shi-Hong HU Chang-qin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Gel filtration chromatography bradford assay residual protein ferment antibiotics lincomycin hydrochloride |
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