lncRNA OIP5-AS1调节miR-942-5p/CHEK1轴对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA（lncRNA）OPA相互作用蛋白5反义转录本1（OIP5-AS1）对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响机制。方法 收集33例胶质瘤患者（低级别胶质瘤14例、高级别胶质瘤19例）和33例颅脑损伤患者的组织标本。实时荧光定量PCR（qPCR）检测组织和细胞中OIP5-AS1、微小RNA-942-5p（miR-942-5p）和检查点激酶1（CHEK1）mRNA表达，分析胶质瘤组织中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA表达水平的相关性。体外培养人脑胶质瘤细胞系U87、SHG-44、U251、H4和正常人星形胶质细胞NHA，Western blot检测细胞中CHEK1蛋白表达。将U87细胞分为对照（NC）组、siRNA阴性对照（si-NC）组、OIP5-AS1 siRNA（si-OIP5-AS1）组、si-OIP5-AS1+inhibitor阴性对照（si-OIP5-AS1+anti-NC）组、si-OIP5-AS1+miR-942-5p抑制剂（si-OIP5-AS1+anti-miR-942-5p）组，采用Lipofectamine 3000试剂进行转染。转染后，qPCR和Western blot检测细胞中OIP5-AS1、miR-942-5p和CHEK1 mRNA和蛋白表达水平；MTT法测定细胞增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡；Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。最后通过双荧光素酶和RNA免疫沉淀（RIP）实验验证OIP5-AS1和miR-942-5p以及CHEK1和miR-942-5p的相互作用。结果 OIP5-AS1和CHEK1在脑胶质瘤组织和细胞中过表达，miR-942-5p呈低表达（均P<0.05）；相关分析显示，脑胶质瘤组织中OIP5-AS1与miR-942-5p的表达水平呈负相关，miR-942-5p与CHEK1 mRNA的表达水平呈负相关，CHEK1与OIP5-AS1 mRNA的表达水平呈正相关；且OIP5-AS1、CHEK1 mRNA在高级别胶质瘤组织中的表达明显高于低级别组织，而高级别胶质瘤中的miR-942-5p水平明显低于低级别组织（P<0.01）。沉默OIP5-AS1可显著上调miR-942-5p，抑制CHEK1的mRNA和蛋白表达（均P<0.05）；沉默OIP5-AS1可显著抑制U87细胞增殖、迁移和侵袭，促进U87细胞凋亡（均P<0.05）；下调miR-942-5p可上调CHEK1表达，阻断OIP5-AS1沉默对脑胶质瘤细胞生物学行为的影响（均P<0.05）。双荧光素酶和RIP实验证实miR-942-5p是OIP5-AS1的靶基因，CHEK1是miR-942-5p的下游靶基因。结论 沉默OIP5-AS1可能通过上调miR-942-5p抑制CHEK1表达，抑制脑胶质瘤细胞的侵袭和迁移，并促进细胞凋亡。

lncRNA OIP5-AS1 regulates the effect of miR-942-5p/CHEK1 axis on the biological behavior of glioma cells