一种抗TNFα单抗不同粒径级别蛋白聚体监测结果的比较与评价

目的：探讨在单克隆抗体（单抗）稳定性研究中，分子排阻高效液相色谱法（size exclusion-highperformance liquid chromatography，SEC-HPLC）、微流数字成像（microflow digital imaging，MDI）技术、澄清度及可见异物检查在不同粒径级别蛋白聚体监测中的交互作用。方法：分别采用SEC-HPLC、MDI、澄清度及可见异物检查研究肿瘤坏死因子α（TNFα）靶点单抗在4℃储存6个月、37℃和6000 lx光照条件下储存28 d后，蛋白聚体、不溶性微粒、澄清度及可见异物的不同变化。结果：SEC-HPLC结果表明，与样品在4℃储存6个月的结果相比，抗TNFα单抗的蛋白聚体含量在37℃和6000 lx照度处理28d后均增加均不明显。使用MDI技术可见，抗TNFα单抗经37℃和6000 lx照度处理28 d后，1~10 μm、10 μm以上、25 μm及以上粒径的微粒数量比在4℃储存6个月的样品有明显增多，且增多的微粒主要为蛋白聚体。通过目视法对样品的澄清度和可见异物检查发现，37℃储存和6000 lx照度处理28 d后的抗TNFα单抗澄清度低于4℃储存的样品；各储存条件下的抗TNFα单抗均未检出可见异物。结论：在单抗稳定性研究中，纳米级、微米级蛋白聚体的形成上并不具有一致性，因此，应采用多种方法对蛋白聚集情况进行表征和分析，避免单一方法的局限。