表皮生长因子受体通路基因干扰与放线菌素D联合对胶质瘤生长抑制作用的研究

目的探讨靶向性表皮生长因子受体（EGFR）信号转导通路关键基因丝氨酸苏氨酸激酶（AKT）小分子干扰RNA构建体与化疗药放线菌素D（ACTD）联合对胶质瘤生长的抑制作用。方法选择AKT的siRNA靶序列构建靶向AKT的siRNA表达质粒，并以空载siRNA表达质粒为对照进行脂质体介导的小分子干扰siRNA表达质粒单独及分别与化疗药物ACTD对胶质瘤细胞C6系生长抑制作用的研究。TUNEL法分析细胞凋亡；流式细胞术分析细胞周期变化，^3H-TdR掺人法分析细胞增殖。结果与c6细胞和转染空载体的C6细胞比较，转染siRNA表达质粒组AKT表达下调72％。TUNEL法发现C6组和空载转染组几乎没有凋亡细胞，而siRNA表达质粒组的凋亡率明显增加（Χ^2=35．26，P〈0．01）；流式细胞分析发现siRNA表达载体转染后S期指数较对照细胞减少，而加入化疗药物ACTD后S期指数较对照细胞明显减少^3H-TdR掺人法发现与C6组和空载转染组比较，转染组细胞自第2天起存活率均明显下降（P〈0．01），且加入ACTD后治疗各组之间存活率也有明显差异（均P〈0．01）；以siRNA表达载体转染组联合ACTD组减低最显著。结论靶向AKT的siRNA表达质粒联合化疗药ACTD显著抑制肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡。因此，质粒介导的siRNA表达载体为胶质瘤靶向性基因治疗与化疗药物联合可以成为胶质瘤治疗的一种新策略。