费氏链霉菌脱氢酶NeoE的生物信息学分析及其对产新霉素的影响

摘要：目的 NeoE是费氏链霉菌合成新霉素途径中一种重要的NAD(P)+依赖性脱氢酶，本研究的目的是预测其生物学性质 及其对新霉素合成能力的影响。方法 由NCBI网站蛋白质数据库获得NeoE氨基酸序列，利用生物信息学网站及软件分析预测 其特征。随后构建neoE过表达质粒，以接合转移方式得到高产重组菌株SF-neoE。最后经摇瓶发酵以及相关基因的转录分析探 究NeoE对新霉素生物合成的影响。结果 NeoE由340个氨基酸组成，理论相对分子质量约为35228.33 Da，理论pI值5.14，不存 在信号肽和跨膜区，是一个疏水性的稳定胞内蛋白。对含空载质粒菌株和重组菌株摇瓶发酵与RT-qPCR分析，结果表明第48小 时neoE的相对表达水平较对照菌株提高了2.1倍，且NeoE的过量表达使得新霉素效价提高42%。结论 该结果为提高新霉素效价 提供思路，并为后续定向改造NeoE探究其对费氏链霉菌生长代谢的影响奠定理论基础。

Bioinformatics analysis of Streptomyces fradiae dehydrogenase NeoE and its effect on neomycin production