人胰岛素及其类似物UPLC-MS/MS全序列分析研究 |
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引用本文: | 胡馨月,丁晓丽,陈莹,张慧,李晶,梁成罡.人胰岛素及其类似物UPLC-MS/MS全序列分析研究[J].药物分析杂志,2022(1):13-22. |
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作者姓名: | 胡馨月 丁晓丽 陈莹 张慧 李晶 梁成罡 |
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作者单位: | 中国食品药品检定研究院激素室国家卫生健康委员会生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室国家药品监督管理局化学药品质量研究与评价重点实验室 |
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基金项目: | 国家科技重大专项课题资助项目(2018ZX09101001-003); |
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摘 要: | 目的:建立采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人胰岛素及其类似物全序列的方法。方法:该方法以人胰岛素为主要研究对象,首先对其进行还原烷基化前处理,后进行UPLC-MS/MS分析。采用ACQUITY UPLC peptide BEH C18(100 mm×2.1 mm, 1.7μm, 300?)色谱柱,流动相A为0.1%甲酸/水溶液,流动相B为0.1%甲酸/乙腈溶液,梯度洗脱(0~10 min, 3%B→60%B;10~10.5 min, 60%B→95%B;10.5~14 min, 95%B;14~14.5 min, 95%B→3%B;14.5~20 min, 3%B),流速0.3 mL·min-1,柱温50℃;采用电喷雾离子源正离子(ESI~+)扫描,通过优化质谱参数,对人胰岛素及其类似物进行“top-town”全序列的测定分析,并对人胰岛素的序列测定方法进行了深入的研究,同时考察该方法对门冬胰岛素和赖脯胰岛素的适用性。结果:该方法能够较好地覆盖人胰岛素A和B链的全序列,通过b/y离子分析,5个高强度b/y离子的离子强...
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关 键 词: | 糖尿病 人胰岛素及其类似物 超高效液相色谱-串联质谱 全序列测定 N端序列测定 |
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