三乙烯四胺对c-myc启动区转录活性的调节作用 |
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引用本文: | 邓小红,殷菲,刘建辉,郭莉霞.三乙烯四胺对c-myc启动区转录活性的调节作用[J].中国药理学与毒理学杂志,2009,23(5):375-380. |
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作者姓名: | 邓小红 殷菲 刘建辉 郭莉霞 |
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作者单位: | 重庆工商大学药物化学与化学生物学研究中心,重庆,400067 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目,国家自然科学基金资助项目,教育部新世纪优秀人才计划资助项目,重庆科委公关项目资助项目 |
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摘 要: | 目的探讨三乙烯四胺(TETA)如何调节c-myc基因表达。方法利用圆二色谱分析TETA对c-myc启动区核酸酶超敏元件Ⅲ1(c-mycNHEⅢ1)碱基序列形成的G-四链体DNA(G4-DNA)结构稳定性的影响。同时,分别构建含c-mycNHEⅢ1的野生型和突变型的c-myc启动区荧光报告质粒,并分别转染HEK293细胞24h后,再接种到96孔板,TETA以终浓度0,0.1,1.0,10及100μmol·L-1处理8h,测定荧光素酶活性,计算TETA对其转录活性抑制率。结果圆二色谱实验结果表明,TETA5μmol·L-1就能够进一步增强c-myc NHEⅢ1在240nm处的负峰和260nm处的正峰的形成,即增强G4-DNA结构的稳定性。报告基因分析结果表明,TETA能够浓度依赖性地抑制野生型c-myc启动区荧光素酶基因的表达,但对突变型c-myc启动区荧光素酶基因的抑制能力明显下降。在TETA1nmol·L-1作用时,对突变型c-myc启动区荧光素酶基因抑制率仅为4.3%,而对野生型的抑制率还高达30.4%。结论TETA可能通过稳定c-mycNHEⅢ1序列形成的G4-DNA结构调节基因的表达。
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关 键 词: | 三乙烯四胺 基因 c-myc 启动区 核酸酶超敏元件Ⅲ1 |
收稿时间: | 2009-1-19 |
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