以CD54为评价指标的THP-1细胞光致敏体外评价方法的确定和验证

目的 确定并验证以细胞表面标志物CD54作为评价指标的光致敏体外评价方法。方法 将THP-1细胞与多种光致敏剂、光刺激剂、皮肤致敏剂、皮肤刺激剂和阴性受试物分别孵育，在光照射或避光处理后，用流式细胞仪测定细胞表面标志物CD54和CD86的表达水平并统计分析，进一步确定具体的评价指标，并对该方法的准确性、特异性、灵敏度、重复性进行验证。结果 19种光致敏剂中有15种引起照射组THP-1细胞表达CD54的平均荧光强度（MFI）较非照射组显著增加（P<0.05、0.01） ，且照射组细胞表达CD54的相对荧光强度（RFI）值均在1.5以上。光刺激剂经光照射后也可引起细胞表达CD54的MFI显著增加（P<0.01） ，但经过预照射处理后，CD54的表达水平较直接照射组显著下降（P<0.01）。未经光照射条件下，皮肤致敏剂即可引起THP-1细胞表达CD54和CD86的MFI比对照组显著增加（P<0.01） ，光照后CD54的表达反而略有下降。在光照和避光条件下，皮肤刺激剂、阴性受试物（乳酸）均未引起细胞表达CD54或CD86的显著性变化。以CD54为评价指标的THP-1细胞光致敏评价方法检测光致敏剂的准确性、特异性和灵敏度分别是85.2%、100%和78.9%，具有良好的重复性。结论 确定了THP-1细胞光致敏评价方法的细胞表面标志物评价指标为CD54，判定标准为：（1）光照后THP-1细胞表达CD54的MFI较照射前显著性增加；（2）光照后THP-1细胞表达CD54的RFI≥1.5；（3）当上述条件均满足时，对受试物进行预照射处理，结果仍然满足前2条标准。

Identification and validation for in vitro photoallergy evaluation method of THP-1 cell with CD54 as evaluation index