| 重组巴氏杆菌透明质酸合成酶的克隆、表达及活性鉴定 |
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| 引用本文： | 彭辰,葛昊,何书英,高向东.重组巴氏杆菌透明质酸合成酶的克隆、表达及活性鉴定[J].中国药科大学学报,2009,40(6):549-552. |
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| 作者姓名： | 彭辰 葛昊 何书英 高向东 |
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| 作者单位： | 中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 基金项目 江苏省“六大人才高峰”项目资助（No.2008033） |
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| 摘 要： | 目的： 构建重组巴氏杆菌透明质酸合成酶(rPmHAS)原核表达系统，获取高纯度、有活性的rPmHAS。方法： 利用大肠杆菌BL-21 pET32a(+)表达重组蛋白，镍亲和柱纯化，夹心竞争ELISA法检测酶活性。结果： Western blotting 检测显示特异性条带，重组蛋白正确表达，镍亲和柱纯化后得到重组蛋白的纯度可达90%。结论： 成功构建了pET32a(+)/rPmHAS重组质粒并实现了目的蛋白高效可溶表达，为PmHAS性质相关研究及单一相对分子质量寡聚透明质酸的合成奠定了基础。
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| 关 键 词： | rPmHAS 表达 纯化 活性鉴定 |
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