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聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用
引用本文:边杉,王颖,于涛,丁选胜,吴梧桐,叶波平,奚涛.聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用[J].中国药科大学学报,2004,35(2):81-85.
作者姓名:边杉  王颖  于涛  丁选胜  吴梧桐  叶波平  奚涛
作者单位:中国药科大学生命科学与技术学院,南京,210009
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划),国家自然科学基金,江苏省自然科学基金
摘    要:目的:探讨聚丙烯酰胺凝胶银染技术在半定量RT-PCR中的应用.方法:提取正常组大鼠和链脲佐菌素致糖尿病模型组大鼠心肌组织总RNA,逆转录得到cDNA第一链,以此为模板进行PCR扩增,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DNA银染技术分析不同循环数及模板量与PCR产物量间的关系.结果:PCR扩增反应在第20~25个循环,起始模板量为0.8~2.4μg时,PCR产物量与起始模板量呈现较好的线性关系.结论:通过控制起始模板量,减少PCR循环数使目的基因的扩增处于PCR扩增指数期,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和DM银染技术,可以通过比较PCR扩增产物量的变化以分析目的基因表达水平的差异.

关 键 词:聚丙烯酰胺凝胶电泳  DNA银染  半定量RT-PCR
文章编号:1000-5048(2004)02-0178-05
修稿时间:2003年11月27

Application of Silver Staining of Polyacrylamide Gels in Semi-Quantitative RT-PCR
Abstract:
Keywords:Polyacrylamide gel  Silver staining  Semi  quantitative RT  PCR
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