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万古霉素糖基转移酶GtfE的异源表达与体外活性检测
引用本文:
王元希,陈俊升,邵雷,李继安,林惠敏,陈代杰.万古霉素糖基转移酶GtfE的异源表达与体外活性检测[J].中国药科大学学报,2013,44(3):272-276.
作者姓名:
王元希
陈俊升
邵雷
李继安
林惠敏
陈代杰
作者单位:
上海医药工业研究院 创新药物与制药工艺国家重点实验室;上海医药工业研究院 创新药物与制药工艺国家重点实验室;上海医药工业研究院 创新药物与制药工艺国家重点实验室;上海医药工业研究院 创新药物与制药工艺国家重点实验室;上海医药工业研究院 创新药物与制药工艺国家重点实验室;中国医药工业研究总院
基金项目:
国家自然科学基金资助项目(No.81072557,No.81172962);国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(No.2012ZX09201101-008)
摘 要:
为了得到具有糖基转移酶活性的重组蛋白,从万古霉素产生菌总DNA中克隆万古霉素糖基转移酶基因
gtfE
,连入pET-37b构建表达质粒并转入大肠杆菌BL21(DE3)表达,体外测定纯化后的重组蛋白糖基转移酶活性,用HPLC和ESI-MS检测反应产物。结果表明,重组蛋白具有预期活性,可以催化尿苷二磷酸葡萄糖与万古霉素苷元的糖基化反应。本研究为获得糖基多样性的万古霉素奠定理论基础。
关 键 词:
万古霉素
生物合成
糖基转移酶
异源表达
体外转糖反应
Heterologous expression and
in vitro
activity of vancomycin glycosyltransferase GtfE
Abstract:
Keywords:
vancomycin
biosynthesis
glycosyltransferase
heterologous expression
in vitro
glycosylation reaction
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