| 重组人血清白蛋白第3结构域-Nartograstim融合蛋白在毕赤酵母中的表达及初步活性研究 |
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| 引用本文： | 赵述强,张瑜,田浤,刘超,高向东.重组人血清白蛋白第3结构域-Nartograstim融合蛋白在毕赤酵母中的表达及初步活性研究[J].中国药科大学学报,2013,44(6):577-582. |
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| 作者姓名： | 赵述强 张瑜 田浤 刘超 高向东 |
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| 作者单位： | 中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院;中国药科大学生命科学与技术学院 |
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| 基金项目： | 江苏省“青蓝工程”资助项目(2010) |
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| 摘 要： | 将人血清白蛋白第3结构域(3DHSA)与粒细胞集落刺激因子突变体(Nartograstim)融合基因克隆至载体pPICzαA，置于醇氧化酶启动子(AOX)和α交配因子信号肽作用下构建分泌表达质粒，电击转化入毕赤酵母GS115。SDS-PAGE结果显示3DHSA-Nartograstim相对分子质量约为42 kD，Western blot证实其同时具有HSA和G-CSF的抗原性。建立融合蛋白表达的条件为:BMMY培养基pH 6.0、1.5%甲醇、诱导84 h，灰度扫描发现该条件下融合蛋白的纯度为79%。依次采用亲和色谱和疏水色谱纯化得到纯度高于90%的融合蛋白，终产量为86 mg/L。采用MTT法检测融合蛋白对NFS-60细胞株的促增殖能力，结果显示，3DHSA-Nartograstim具有剂量依赖性促进NFS-60细胞增殖的作用。本研究为3DHSA-Nartograstim的进一步研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 人血清白蛋白 粒细胞集落刺激因子 3DHSA 毕赤酵母 |
Expression and bioactivity of recombinant 3DHSA-Nartograstim fusion protein in Pichia pastoris |
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| ZHAO Shuqiang,ZHANG Yu,TIAN Hong,LIU Chao and GAO Xiangdong.Expression and bioactivity of recombinant 3DHSA-Nartograstim fusion protein in Pichia pastoris[J].Journal of China Pharmaceutical University,2013,44(6):577-582. |
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| Authors: | ZHAO Shuqiang ZHANG Yu TIAN Hong LIU Chao and GAO Xiangdong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human serum albumin granulocyte colony-stimulating factor 3DHSA Pichia pastoris |
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