人端粒酶逆转录酶诱导的猪肝细胞初步鉴定 |
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引用本文: | 潘小平,李兰娟,曹红翠,杜维波,章益民,盛国平,陈瑜,李君.人端粒酶逆转录酶诱导的猪肝细胞初步鉴定[J].浙江医学,2006,28(2):103-105,109. |
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作者姓名: | 潘小平 李兰娟 曹红翠 杜维波 章益民 盛国平 陈瑜 李君 |
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作者单位: | 310003,杭州,浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 |
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基金项目: | 国家科技攻关项目;国家科技攻关项目 |
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摘 要: | 目的观察应用四步灌流法分离后原代猪肝细胞的数量和活力,初步鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)诱导的猪肝细胞的生物学特性。方法四步灌流法分离12只猪肝脏组织中的猪肝细胞,采用锥虫蓝拒染法测定其肝实质细胞数量和活力;将含hTERT真核表达的载体转染到原代猪肝细胞,经G418硫酸盐筛选,获得耐药性的猪肝细胞克隆并传代3代。观察原代猪肝细胞和hTERT诱导后的猪肝细胞的形态,检测两种猪肝细胞不同时期培养上清液中白蛋白、尿素氮的浓度。结果每只肝脏的肝细胞产量约为2.0×1010个,具有活力的肝细胞所占百分比为(95.5±3.2)%。原代猪肝细胞和hTERT诱导的猪肝细胞培养上清中分泌白蛋白和尿素氮在前3天无统计学差异(P>0.05),第4、5天差异有统计学意义(P<0.05)。结论四步灌流法分离获取的猪肝细胞产量高、功能活性好。hTERT诱导的猪肝细胞具有正常肝细胞的基本功能,可作为生物人工肝及细胞移植等的理想的细胞源。
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关 键 词: | 人端粒酶逆转录酶 猪肝细胞 生物人工肝支持系统 永生化 |
收稿时间: | 2005-12-14 |
修稿时间: | 2005-12-14 |
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