依维莫司联合RSL3诱导肺腺癌细胞铁死亡的机制研究

目的探讨依维莫司（EVE）联合铁死亡诱导剂（RSL3）诱导肺腺癌细胞铁死亡的作用及机制。方法人肺腺癌细胞系PC9和H1299分为对照组（药物浓度为0）、不同浓度EVE组、不同浓度RSL3组和EVE+RSL3组，加入相应药物培养。检测铁抑制素1（Fer-1）效果时再加入Fer-1。采用噻唑蓝溴化四唑法检测各组细胞存活率，采用丙二醛（MDA）检测法、铁比色分析法分别检测细胞内MDA、亚铁离子（Fe2+）相对水平；采用Westernblot法检测磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）及谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）4相对表达量。结果相比对照组，不同浓度EVE组细胞存活率无明显变化（P＞0.05）；相比RSL3组，EVE+RSL3组细胞存活率显著降低（P＜0.01）。相比未加Fer-1的EVE+RSL3组，加入Fer-1后EVE+RSL3组细胞存活率显著升高（P＜0.05）。相比其他3组，EVE+RSL3组细胞内Fe2+和MDA相对水平均显著升高（均P＜0.05），p-mTOR和GPX4蛋白相对表达量均显著降低（均P＜0.05）；相比RSL3组，EVE+RSL3组p-mTOR和GPX4蛋白相对表达量均显著降低（均P＜0.01）。结论EVE联合RSL3可能通过mTOR/GPX4通路诱导肺腺癌细胞发生铁死亡。