反义硫代脱氧寡核苷酸体外抑制CVB持续感染的研究

目的：了解21聚体反义硫代脱氧寡核苷酸（AODN）体外对CVB3、CVB5持续感染的抑制作用。方法：人工合成AODN，进行脂质体包埋，并按不同浓度分别加入CVB3-ECV304、CVB5-ECV304持续感染细胞模型。对药物作用后持续感染细胞模型，观察其培养上清液致Vero细胞病变能力的改变；ELISA法检测CVB3、CVB5抗原产生的抑制率：RT—PCR检测细胞内病毒RNA表达情况；ELISA检测培养上清液分泌TNF—α浓度。同时进行正义和随机寡核苷酸（SODN、RODN）抗病毒能力检测，并与AODN结果比较。结果：AODN可抑制持续感染CVB3、CVB5抗原合成，随药物浓度的增高，抗原抑制率也升高；经AODN作用后，持续感染细胞培养上清液致Vero细胞病变能力下降．上清液中病毒滴度减少；RT-PCR在经AODN作用的CVB3-ECV304、CVB5-ECV304组中未检测到病毒RNA；经AODN作用后．持续感染的CVB3-ECV304、CVB5-ECV304细胞产生TNF-α浓度升高：针对CVB3 5＇端非编码区基因组序列合成的AODN对CVB5持续感染也有较强的抑制作用；AODN对持续感染病毒的抑制作用强于SODN和RODN组。结论：AODN能体外抑制CVB3、CVB5持续感染，刺激细胞合成TNF-α。这种作用有序列特异性。但同组间病毒有交叉抑制作用，这种作用可能与CVB3、CVB5基因序列同源有关。

Study on inhibition of persistent infection of Coxsackievirus B group by antisense phosphorothioate oligodeoxynucleotide in vitro