| 研究脂多糖在建立内毒素感染细胞模型中的应用 |
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| 引用本文： | 叶静,陈宁,汤特,朱学良.研究脂多糖在建立内毒素感染细胞模型中的应用[J].天津医科大学学报,2002,8(4):445-447. |
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| 作者姓名： | 叶静 陈宁 汤特 朱学良 |
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| 作者单位： | 天津医科大学病理生理教研室,天津,300070 |
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| 摘 要： | 目的 :从大肠杆菌中制备LPS ,经凝胶色谱纯化 ,用纯化的LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞产生TNF ,建立内毒素感染的细胞模型。方法 :收集培养的大肠杆菌 ,洗去菌毛 ,冻干研磨成菌粉 ,经沸水浴提取 ,蛋白酶K消化 ,制成初提物。再用SephadexG -75色谱柱洗脱 ,收集纯化的组分。将纯化的LPS ,稀释成不同的浓度加入长有巨噬细胞的培养板中 ,刺激一定的时间后 ,收集上清液。用ELISA方法检测上清液中的TNF -α含量。结果 :纯化的LPS用紫外/可见光分光光度计扫描 ,呈单一吸收峰 ,并能被鲎试剂特异检出。用2.5μg/ml和5μg/mlLPS诱导巨噬细胞 ,24h后 ,培养上清液中的TNF -α含量分别为(8.13±1.25)pg/ml和(7.50±4.51)pg/ml(x±sn=4)。结论 :本法制备的LPS纯度较高 ,对鲎试剂高度敏感 ,有较好的内毒素活性 ,能满足建立内毒素感染的细胞模型的需要。该法简便、快速、适合实验室小量制备
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| 关 键 词： | 细胞模型 大肠杆菌 脂多糖 肿瘤坏死因子 LPS |
| 文章编号： | 1006-8147(2002)04-0445-03 |
| 修稿时间： | 2002年9月19日 |
Preparation of lipopolysaccharide and its application in establishment of cellular model of endotoxine infection |
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| YE Jing,CHEN Ning,TANG Te,ZHU Xue-liang.Preparation of lipopolysaccharide and its application in establishment of cellular model of endotoxine infection[J].Journal of Tianjin Medical University,2002,8(4):445-447. |
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| Authors: | YE Jing CHEN Ning TANG Te ZHU Xue-liang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Escherichia coli Lipoplysaccharide Tumor necrosis factor |
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