| hsa-mir-520真核表达载体的构建及对E-钙粘蛋白表达的影响 |
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| 引用本文： | 张潞渝,孔璟,李春蕾,高剑,叶彬,武卫华,刘革力.hsa-mir-520真核表达载体的构建及对E-钙粘蛋白表达的影响[J].第三军医大学学报,2011,33(9). |
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| 作者姓名： | 张潞渝 孔璟 李春蕾 高剑 叶彬 武卫华 刘革力 |
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| 作者单位： | 张潞渝,刘革力(重庆医科大学分子医学与肿瘤中心,重庆,400016);孔璟,高剑(重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室,重庆,400016);李春蕾(重庆医科大学附属第一医院妇产科,重庆,400016);叶彬,武卫华(400016,重庆,重庆医科大学分子医学与肿瘤中心;400016,重庆,重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室) |
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| 摘 要： | 目的 构建hsa-mir-520真核表达载体,并转染大肠癌细胞SW-480细胞,检测细胞中E-钙粘蛋白表达情况.方法 依据miRBase数据库中hsa-mir-520序列,设计并合成寡核苷酸片段,构建hsa-mir-520表达载体和对照载体.采用脂质体转染方法分别将mir-520表达载体、及对照质粒转染大肠癌细胞SW-480细胞株.采用酶切、测序检测载体构建;Western blot检测E-钙粘蛋白的表达.结果 酶切和测序表明hsa-mir-520真核表达载体构建成功.Western blot结果显示与转染对照质粒和未转染的细胞相比,转染了hsa-mir-520重组质粒的细胞中E-cadherin蛋白的表达明显增加(P<0.01),密度扫描半定量分析显示E-cadherin蛋白的表达增加了大约40%.结论 成功构建了hsa-mir-520和对照的真核表达载体,hsa-mir-520质粒转染大肠癌细胞SW-480后可增加E-钙粘蛋白的表达.
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| 关 键 词： | E-钙粘蛋白 SW-480细胞 |
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