| 噬菌体展示肽库筛选VPAC1高亲和力结合多肽 |
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| 引用本文： | 唐波,黄定德,郑磊,任浩,李前伟.噬菌体展示肽库筛选VPAC1高亲和力结合多肽[J].第三军医大学学报,2013,35(1):10-14. |
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| 作者姓名： | 唐波 黄定德 郑磊 任浩 李前伟 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学西南医院核医学科,重庆,400038
2. 400038重庆,第三军医大学西南医院核医学科;100875北京,北京师范大学化学学院放射性药物教育部重点实验室 |
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| 基金项目： | 北京师范大学放射性药物教育部重点实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 目的 通过噬菌体展示肽库技术筛选VPAC1高亲和力结合十二肽配体,并进行特异性和亲和力鉴定.方法 建立稳定表达VPAC1的真核细胞系；利用噬菌体肽库展示技术进行全细胞差减筛选,随机挑取40个噬菌体克隆进行测序,初步鉴定确定阳性克隆,明确外源十二肽序列,固相合成该十二肽；利用体外竞争结合ELISA及流式细胞分析,鉴定目标多肽与VPAC1受体结合的特异性及亲和力.结果 成功构建稳定表达VPAC1细胞系；经过4轮差减筛选,回收噬菌体逐轮得到富集,随机挑取40个克隆测序,共得到15条序列不同的多肽,经ELISA鉴定有7个克隆与细胞有特异性高结合能力；阳性噬菌体克隆与细胞结合通过多肽VP1介导；VP1能特异高亲和地与VPACl受体结合.结论 通过噬菌体展示肽库技术成功筛选得到与VPAC1高亲和力特异结合十二肽.
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| 关 键 词： | VPAC1 稳定转染 噬菌体展示肽库 十二肽 分子探针 |
Screening of a high-affinity peptide specific for VPAC1 from phage display peptide library |
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