| 人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 赵亮,李静,魏强,游智梅,夏菁,李丹阳,陈地龙.人PGI基因siRNA慢病毒质粒的构建及对白血病细胞增殖的影响[J].第三军医大学学报,2013,35(1):20-23. |
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| 作者姓名： | 赵亮 李静 魏强 游智梅 夏菁 李丹阳 陈地龙 |
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| 作者单位： | 400016重庆,重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,干细胞与组织工程研究室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，重庆市教委基金 |
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| 摘 要： | 目的 构建共表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因和人磷酸葡萄糖异构酶(phosphoglucose isomerase,PGI)基因的慢病毒载体,初步探讨干扰人PGI基因对白血病细胞增殖的影响.方法 RT-PCR、Western blot检测人单核细胞、K562、KG1-α、HL-60细胞中PGI mRNA和蛋白表达水平,筛选高表达PGI的白血病细胞系；构建人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照,经293T细胞包装后,获得可表达人PGI基因siRNA的慢病毒载体及阴性对照；分别使用重组病毒(干扰组)、原始病毒(阴性对照组)和等量PBS(空白对照组)转染白血病KG1-α细胞,筛选稳定转染细胞株.RT-PCR和Western blot检测干扰组、阴性对照组及空白对照组KG1-α细胞PGI基因表达水平；CCK-8检测各组细胞增殖情况并作生长曲线.结果 PGI基因在白血病KG1-a细胞中高表达；成功构建了稳定低表达PGI的白血病细胞株(KG1-α-siPGI)；低表达PGI基因的KG1-α细胞增殖能力较空白对照组明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 成功构建了低表达PGI基因的白血病KG1-α细胞株,干扰PGI基因的表达能够抑制KG1-α细胞的生长.
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| 关 键 词： | 白血病 慢病毒载体 RNA干扰 细胞增殖 |
Construction of a lentiviral vector expressing human phosphoglucose isomerase gene siRNA and its influence on leukemia cell proliferation |
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