| 用嗜热菌蛋白酶进行人肠上皮细胞分离培养 |
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| 引用本文： | 张道杰,蒋建新,陈永华,熊健琼,段朝霞,朱佩芳.用嗜热菌蛋白酶进行人肠上皮细胞分离培养[J].第三军医大学学报,2004,26(11):1016-1018. |
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| 作者姓名： | 张道杰 蒋建新 陈永华 熊健琼 段朝霞 朱佩芳 |
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| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划) |
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| 摘 要： | 目的探讨人肠上皮细胞(intestinal epithelial cell,IEC)的分离、培养及鉴定方法,为进一步研究IEC提供合适的细胞模型.方法取4～6个月合法引产胎儿小肠,用嗜热菌蛋白酶消化分离IEC,接种于含多种促IEC生长的营养成分的DMEM培养液内,根据IEC和成纤维细胞贴壁时间的差异来纯化IEC,通过观察IEC生长状态、形态特征、超微结构及检测上皮细胞膜抗原对IEC进行鉴定.结果嗜热菌蛋白酶消化2 h可分离出大量的健全绒毛隐窝单位,进一步培养获得的IEC,上皮细胞膜抗原均呈阳性.结论选用嗜热菌蛋白酶作为分离IEC的消化酶,可获得较纯的IEC,完全可供相关实验研究之用.
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| 关 键 词： | 嗜热菌蛋白酶 肠上皮细胞 原代培养 |
| 文章编号： | 1000-5404(2004)11-1016-03 |
| 修稿时间： | 2003年1月30日 |
Isolation and culture of human intestinal epithelial cells using dissociating enzyme thermolysin |
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