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重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染
引用本文:闫国和,粟永萍,王军平,汪代杰,艾国平,王锋超,冉新泽,程天民.重组真核表达载体pEGFP-N1/PDGF-A的构建及真皮干细胞的转染[J].第三军医大学学报,2005,27(20):2005-2008.
作者姓名:闫国和  粟永萍  王军平  汪代杰  艾国平  王锋超  冉新泽  程天民
作者单位:第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所,四川省泸州市人民医院肿瘤科,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所,第三军医大学军事预防医学院防原医学教研室、全军复合伤研究所 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038,泸州646000,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038
基金项目:国家重点基础研究发展规划资助项目(“973”项目2005CB522605),国家自然科学基金资助项目(30200142)~~
摘    要:目的克隆血小板衍生生长因子A链(plateletderivedgrowthfactorAchain,PDGFA)基因,以增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)载体pEGFPN1为骨架,携带PDGFA基因进入真皮间充质干细胞(dermisdrivedmesenchymalstemcells,DMSCs),为采用转入PDGFA基因的DMSCs修复创面奠定基础。方法采用RTPCR二步分离法,以人肝癌细胞系(SMC7721)的总RNA为模板,扩增PDGFA基因的全长cDNA编码序列,克隆入载体pMD18T,随后又将PDGFA基因亚克隆入pEGFPN1载体中,构建PDGFA基因的真核表达载体pEGFPN1/PDGFA,并采用Fugene6介导转染技术将PDGFA基因导入DMSCs。结果克隆到PDGFA基因的全长cDNA序列,经测序验证,其序列与GenBank所报告的该基因的序列完全一致。结论成功地将PDGFA基因克隆到pEGFPN1载体中,并实现了PDGFA基因在DMSCs的表达。

关 键 词:克隆  真核表达载体  血小板衍生生长因子A链基因  绿色荧光蛋白  真皮间充质干细胞
文章编号:1000-5404(2005)20-2005-04
收稿时间:2005-03-03
修稿时间:2005-09-12

Construction of eukaryotic expressing vector pEGFP-N1/PDGF-A for transducting Dermis-derived mesenchymal stem cells
YAN Guo-he,SU Yong-ping,WANG Jun-ping , WANG Dai-jie, AI Guo-ping,WANG Feng-chao,RAN Xin-ze,CHENG Tian-min.Construction of eukaryotic expressing vector pEGFP-N1/PDGF-A for transducting Dermis-derived mesenchymal stem cells[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2005,27(20):2005-2008.
Authors:YAN Guo-he  SU Yong-ping  WANG Jun-ping  WANG Dai-jie  AI Guo-ping  WANG Feng-chao  RAN Xin-ze  CHENG Tian-min
Abstract:
Keywords:cloning  eukaryotic expression vector  platelet-derived growth factor A chain gene  enhanced green fluorescent protein  dermis-drived mesenchymal stem cells
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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