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超声联合微泡造影剂携p53基因转染宫颈癌HeLa细胞的实验研究
引用本文:唐艳,熊正爱,李攀,王志刚,董培婷.超声联合微泡造影剂携p53基因转染宫颈癌HeLa细胞的实验研究[J].第三军医大学学报,2009,31(23):2323-2326.
作者姓名:唐艳  熊正爱  李攀  王志刚  董培婷
作者单位:1. 重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆,400010
2. 重庆医科大学附属第二医院超声影像研究所,重庆,400010
摘    要:目的 探讨超声联合微泡造影剂介导野生型p53(wtp53)基因转染宫颈癌HeLa细胞的可行性、效率性及作用效果.方法 以前期实验所筛选的超声辐照参数(300 kHz,0.5 W/cm~2,30 s)为实验条件,将HeLa细胞分为质粒组(A组)、质粒+超卢组(B组)、质粒+超声+微泡组(C组)、质粒+脂质体组(D组)、空白对照组(E组),分别进行处理.转染24~48 h后,收集各组细胞,荧光显微镜观察细胞基因转染效率、RT-PCR检测p53 mRNA表达,流式细胞仪检测细胞周期,M1Tr检测细胞增殖抑制情况.结果 荧光显微镜下见C、D组均有较多绿色荧光蛋白表达的细胞(转染率分别为14.15%和10.86%),B组仅有极少的荧光细胞(0.81%);A组和E组无荧光表达;RT-PCR结果 显示,C组和D组均可见特异性p53电泳条带,C组的电泳条带的光密度比值高于D组(P<0.05);流式细胞仪测细胞周期展示,转染野生型p53基因能使细胞周期出现明显的G_1期阻滞,C、D组与E组相比差异有显著性(P<0.05);MTT测定结果 显示c组细胞生长明显受抑,且随时间的延长,抑制程度逐渐增强.结论 适当浓度的微泡和优化的超声辐照条件可增强基因转染效率,野生型p53基阒能使HeLa细胞产生G_1期阻滞,抑制宫颈癌细胞生长.

关 键 词:超声  微泡造影剂  宫颈癌  基因治疗

Experimental study of p53 plasmid transfected into HeLa cells by ultrasound microbubble intensifier
TANG Yan,XIONG Zheng-ai,LI Pan,WANG Zhi-gang,DONG Pei-ting.Experimental study of p53 plasmid transfected into HeLa cells by ultrasound microbubble intensifier[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2009,31(23):2323-2326.
Authors:TANG Yan  XIONG Zheng-ai  LI Pan  WANG Zhi-gang  DONG Pei-ting
Institution:TANG Yan1,XIONG Zheng-ai1,LI Pan2,WANG Zhi-gang2,DONG Pei-ting1 (1 Department of Obstetrics and Gynecology,2 Institute of Ultrasonography,Second Affiliated Hospital,Chongqing Medical University,Chongqing 400010,China)
Abstract:Objective To explore the feasibility,efficiency and effect of wide-type p53 gene transfected into cervical cancer HeLa cells by ultrasound microbubble intensifier. Methods Based on the optimum parameter of ultrasound wave irradiation (0.5 W/cm2 ,30 s) selected in pre-experiment,HeLa cells were divided into 5 groups:(A)simple plasmid group,(B)plasmid-ultrasound group,(C)plasmid-ultrasound-microbubble group,(D)plasmid-liposome group,(E)blank control group. At 24-48h after transfection,the transfection efficie...
Keywords:ultrasound  microbubble contrast agent  cervical cancer  gene therapy
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