丙型肝炎病毒核心蛋白对Dicer切割功能的影响 |
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引用本文: | 黄文娟,李霞,胡琴,陈维贤.丙型肝炎病毒核心蛋白对Dicer切割功能的影响[J].第三军医大学学报,2013,35(14):1451-1454. |
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作者姓名: | 黄文娟 李霞 胡琴 陈维贤 |
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作者单位: | 重庆医科大学附属第二医院检验科, 重庆,400010 |
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基金项目: | the National Natural Science Foundation of China,国家自然科学基金 |
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摘 要: | 目的 探讨核心蛋白与Dicer的相互作用及其对Dicer功能的影响.方法 构建丙型肝炎病毒核心蛋白真核表达质粒,采用免疫荧光染色和Western blot检测核心蛋白的表达,Western blot检测核心蛋白对细胞内Dicer表达的影响,免疫共沉淀技术检测真核细胞内核心蛋白与Dicer的相互作用.体外转录合成dsRNA,检测核心蛋白对Dicer切割dsRNA作用的影响.结果 在细胞内,核心蛋白能够明显恢复被shRNA抑制的虫荧光素酶基因的表达(P<0.05),而对siRNA引发的RNAi无拮抗作用.在真核细胞内,加入核心蛋白后,Dicer的表达量无明显改变,并能检测到两者相互结合.在体外抑制实验中,重组表达的Dicer能切割dsRNA产生siRNA;核心蛋白加入后,dsRNA的切割受到抑制.结论 核心蛋白在真核细胞内可以结合Dicer,并通过抑制Dicer对dsRNA的切割作用,抑制RNA干扰作用.
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关 键 词: | 丙型肝炎病毒 核心蛋白 Dicer酶 免疫共沉淀 |
Hepatitis C virus core protein interacts with Dicer to inhibit processing of dsRNA |
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Abstract: | |
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Keywords: | hepatitis C virus core protein Dicer immunoprecipitation |
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