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特异性ILK-siRNA对膀胱癌EJ细胞侵袭和迁移的影响
引用本文:朱军,高娟,李红彦,潘湘阳,陈俊霞.特异性ILK-siRNA对膀胱癌EJ细胞侵袭和迁移的影响[J].第三军医大学学报,2011,33(4):360-364.
作者姓名:朱军  高娟  李红彦  潘湘阳  陈俊霞
作者单位:重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心;
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81071719); 重庆市自然科学基金(CSTC2009BB5273)~~
摘    要:目的设计合成有效的ILK-siRNA,并检测其对EJ细胞侵袭和迁移的影响。方法构建针对ILK基因mRNA的2个特异性siRNA表达载体pGenSil-1 siRNA1、pGensil-1 siRNA2和1个阴性对照载体pGenSil-1 siRNA3。稳定转染膀胱癌EJ细胞后,通过RT-PCR检测EJ细胞中ILK mRNA水平的表达,并通过Western blot和细胞免疫荧光检测ILK蛋白水平的表达;观察EJ细胞形态变化;检测EJ细胞迁移、黏附和侵袭能力及基质金属蛋白酶的变化。结果重组质粒构建成功。干扰组细胞ILK mRNA及蛋白的表达分别较3个对照组(未转染组、转空质粒组和转阴性对照质粒组)比较,呈显著性下降(P<0.05);HE染色结果显示,细胞铺展良好,核质比减小;转染干扰质粒的2个实验组细胞的黏附能力相对于对照组分别增加87%和76%,黏附能力显著升高,迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05);与3个对照组比较,转染pGenSil-1 siRNA1与pGensil-1 siRNA2质粒到EJ细胞后,MMP-2及MMP-9的表达水平明显降低(P<0.05)。结论成功构建的干扰质粒能抑制ILK基因及蛋白水平的表达,显著抑制细胞的生长、侵袭及迁移能力。

关 键 词:RNA  小分子干扰  膀胱肿瘤  细胞系  肿瘤  侵袭  迁移  整合素连接激酶

Silencing integrin-linked kinase by small interfering RNA inhibits metastasis and invasion of human EJ bladder cancer cells
Zhu Jun,Gao Juan,Li Hongyan,Pan Xiangyang,Chen Junxia.Silencing integrin-linked kinase by small interfering RNA inhibits metastasis and invasion of human EJ bladder cancer cells[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2011,33(4):360-364.
Authors:Zhu Jun  Gao Juan  Li Hongyan  Pan Xiangyang  Chen Junxia
Institution:Zhu Jun,Gao Juan,Li Hongyan,Pan Xiangyang,Chen Junxia(Department of Cell Biology and Genetics,Center of Molecular Medicine and Cancer Research,College of Basic Medical Sciences,Chongqing Medical University,Chongqing,400016,China)
Abstract:Objective To investigate the effect of the specific siRNA of integrin-linked kinase(ILK) on the migration and invasion of human EJ bladder cancer cells.Methods Two specific siRNA expression vectors and one none homology control vector targeting the objective gene was constructed.Then the vectors were transfected into EJ cells respectively.RNAi efficiency on the expression of ILK was evaluated by RT-PCR,Western blotting and immunofluorescence staining.The morphological change,cell adhesion,migration and inva...
Keywords:RNA  small interfering  urinary bladder neoplasms  cell line  tumor  metastasis  invasion  integirn-linked kinase  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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