| Wilson蛋白N端多克隆抗体的制备和纯化 |
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| 引用本文： | 王莹,丰岩清,国宁,黄帆,徐琳,陈曦,梁秀龄.Wilson蛋白N端多克隆抗体的制备和纯化[J].中山大学学报(医学科学版),2003,24(6):560-563. |
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| 作者姓名： | 王莹 丰岩清 国宁 黄帆 徐琳 陈曦 梁秀龄 |
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| 作者单位： | 中山大学附属第一医院神经科,广东,广州,510080 |
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| 基金项目： | “211工程”重点建设基金资助项目(中山医科大学98138)，广东省自然科学基金资助项目(001413和21894) |
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| 摘 要： | 【目的】制备并纯化Wilson蛋白(ATP7B)的N端多克隆抗体,为进一步研究其基因表达蛋白的结构和功能打下基础。【方法】RT-PCR扩增目的基因,GST基因融合载体表达融合蛋白,亲和层析进行蛋白纯化,Thrombin酶切并收集目的蛋白,免疫家兔,ELISA检测抗体滴度,离子交换层析纯化抗体血清,Westernblot检测抗体特异性。【结果】ELISA方法检测抗体滴度达到了1∶2500,Westernblot表明该抗体有很好的特异性,非变性SDS-PAGE显示纯化后的抗体IgG纯度很高。【结论】应用该方法成功制备了Wilson病蛋白质量的多克隆抗体。
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| 关 键 词： | 肝豆状核变性 融合蛋白 基因表达 多克隆抗体 |
| 文章编号： | 1672-3554(2003)06-0560-04 |
| 修稿时间： | 2003年3月21日 |
Preparation and Purification of Polyclonal Antibody Against N-Terminal of ATP7B |
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| WANG Ying,FENG Yan qing,GUO Ning,HUANG Fan,XU Lin,CHEN Xi,LIANG Xiu ling.Preparation and Purification of Polyclonal Antibody Against N-Terminal of ATP7B[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2003,24(6):560-563. |
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| Authors: | WANG Ying FENG Yan qing GUO Ning HUANG Fan XU Lin CHEN Xi LIANG Xiu ling |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatolenticular degeneration fusion protein gene expression polyclonal antibody |
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