龟板提取物上调维生素D受体表达促骨髓间充质干细胞向成骨分化

目的 探讨龟板提取物诱导大鼠骨髓间充质干细胞 (mesenchymal stem cells, MSCs) 向成骨分化和对维生素D受体 (VDR) 表达的影响。方法 从大鼠骨髓中分离 MSCs，体外培养，利用流式细胞术检测 MSCs 表面抗原 CD44 细胞标志，体外培养 MSCs 分成不同的组观察其向成骨分化，在培养基中不加任何处理的作为对照组，培养基中加成骨诱导液诱导 MSCs 向成骨分化作为阳性对照组，龟板提取物组在培养基中加龟板提取物，诱导 7 d 后，通过免疫化学染色、Western blotting、原位杂交、RT-PCR 等方法观察龟板提取物对原代培养的 MSCs 向成骨分化的成骨分化标记分子碱性磷酸酶 (ALP)、骨桥蛋白 (OPN) 及 VDR 阳性表达及 VDR mRNA 的表达情况。结果 免疫组化染色显示，龟板提取物组成骨分化标记分子 ALP、OPN 和VDR 的阳性百分比明显高于对照组，Western blotting 结果也显示龟板提取物组的 ALP、OPN和 VDR 的蛋白表达水平高于对照组；同时原位杂交、RT-PCR 结果表明，龟板提取物诱导MSCs 向成骨分化过程可明显促进 VDR mRNA 的表达。结论 龟板提取物可促 MSCs 向成骨分化，其机制可能与 VDR 的上调有关。