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转双价抗虫基因 Bt-CpTI 提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性
引用本文:丁如贤,肖 莹,王 凯,陈万生,张汉明,张 磊.转双价抗虫基因 Bt-CpTI 提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性[J].医学教育探索,2009,40(4):621-624.
作者姓名:丁如贤  肖 莹  王 凯  陈万生  张汉明  张 磊
作者单位:1.第二军医大学药学院,上海 200433; 2.第二军医大学长征医院,上海 200003
基金项目:国家自然科学基金资助项目 (39870919, 300709210)
摘    要:目的 将外源苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因 CryIA(c) 和豇豆胰蛋白酶抑制剂基因 CpTI 共同转入四倍体菘蓝以获得鳞翅目昆虫小菜蛾抗性。方法 构建了以 CaMV 35S 为启动子,新霉素磷酸转移酶 (Npt-Ⅱ) 为选择标记,带有 CryIA(c) 基因和 CpTI 基因的植物表达载体 pGBI121S4ABC 并转入根癌农杆菌 LBA4404。采用叶盘法遗传转化四倍体菘蓝。转基因再生植株经 PCR 和 Southern 杂交检测,并进行抗小菜蛾实验。结果 T0 代转化四倍体菘蓝的双基因阳性转化率达到 16.67%。Southern 杂交检测结果表明外源 CryIA(c) 基因和 CpTI 基因均已经随机整合到转基因菘蓝的基因组中。与野生对照相比,转基因四倍体菘蓝对小菜蛾显示出明显抗性。结论 转双价抗虫基因 Bt-CpTI 是提高四倍体菘蓝对小菜蛾抗性的有效手段。

关 键 词:四倍体菘蓝    根癌农杆菌    抗虫    苏云金芽孢杆菌  (Bt)  杀虫蛋白基因  CryIA(c)    豇豆胰蛋白酶抑制剂  (CpTI)    Southern  杂交

Enhanced resistance of transgenic tetraploid Isatis indigotica by Bt and CpTI to moths
DING Ru-xian,XIAO Ying,WANG Kai,CHEN Wan-sheng,ZHANG Han-ming,ZHANG Lei.Enhanced resistance of transgenic tetraploid Isatis indigotica by Bt and CpTI to moths[J].Researches in Medical Education,2009,40(4):621-624.
Authors:DING Ru-xian  XIAO Ying  WANG Kai  CHEN Wan-sheng  ZHANG Han-ming  ZHANG Lei
Institution:1.School of Pharmacy, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China; 2. Changzheng Hospital,Second Military Medical University, Shanghai 200003, China
Abstract:
Keywords:tetraploid Isatis indigotica Fort    Agrobacterium tumefaciens  insect resistance  Bacillus thuringiensis (Bt) crystal protein CryIA(c) gene  cowpea trysin inhibitor (CpTI)  Southern blotting
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