| 优化甲硫氨酸补料策略提高重组毕赤酵母G12-CBS合成S-腺苷甲硫氨酸 |
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| 引用本文： | 武晓乐,秦秀林,姚高峰,储炬,钱江潮.优化甲硫氨酸补料策略提高重组毕赤酵母G12-CBS合成S-腺苷甲硫氨酸[J].医学教育探索,2012(5):587-593. |
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| 作者姓名： | 武晓乐 秦秀林 姚高峰 储炬 钱江潮 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（20976050）；国家高技术研究发展计划（2012AA021201） |
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| 摘 要： | 重组毕赤酵母G12CBS经代谢工程改造，可高效表达重组S腺苷甲硫氨酸（SAM）合成酶，并弱化了SAM转化途径的关键酶β胱硫醚合成酶，是一株优良的SAM高产菌。为了利用G12CBS高效合成SAM，需对前体（甲硫氨酸）的补料策略进行优化。首先在摇瓶中考察了不同甲硫氨酸（LMethionine，LMet）添加量对于G12CBS的影响，发现每24 h LMet补加量超过3 mg/mL时，会影响重组菌生长和SAM合成。在15 L发酵罐中优化LMet的补料速率，当外源补料速率为0.4 g/(L·h)时SAM产量最高，分别比补料速率为0.2 g/(L·h)和0.6 g/(L·h)时提高22.2%和31.8%，达到13.01 g/L，比出发菌最高产量提高54%。代谢物及酶活测定的结果表明，较低的LMet补料速率（0.2 g/(L·h)）导致前体供应不足而影响SAM合成，过高的补料速率（0.6 g/(L·h)）可能会抑制三羧酸循环，并且影响氮源的摄取和利用，从而导致菌体生长和产物合成受到抑制。
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| 关 键 词： | 毕赤酵母 S腺苷甲硫氨酸 甲硫氨酸 |
Optimization of L-Methionine Feeding Strategy for Improving
S Adenosyl L-Methionine Production by Recombinant
Pichia pastoris G12-CBS |
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| WU Xiao-le,QIN Xiu-lin,YAO Gao-feng,CHU Ju and QIAN Jiang-chao.Optimization of L-Methionine Feeding Strategy for Improving
S Adenosyl L-Methionine Production by Recombinant
Pichia pastoris G12-CBS[J].Researches in Medical Education,2012(5):587-593. |
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| Authors: | WU Xiao-le QIN Xiu-lin YAO Gao-feng CHU Ju and QIAN Jiang-chao |
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| Institution: | State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology,
Shanghai 200237, China;State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology,
Shanghai 200237, China;State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology,
Shanghai 200237, China;State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology,
Shanghai 200237, China;State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology,
Shanghai 200237, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pichia pastoris S-adenosyl L methionine L methionine |
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