| 抗HIF-1αmRNA锤头状核酶设计及其基因克隆 |
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| 引用本文： | 李婷,吴永平.抗HIF-1αmRNA锤头状核酶设计及其基因克隆[J].徐州医学院学报,2004,24(4):301-304. |
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| 作者姓名： | 李婷 吴永平 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心,江苏,徐州,221002
2. 徐州医学院病理学教研室 |
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| 基金项目： | 江苏省卫生厅重大科研课题 (H2 0 0 10 4 ) |
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| 摘 要： | 目的 设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶，并构建它的基因表达载体，以便用于肿瘤的基因治疗。方法 用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点，以选定的靶点设计相应的锤头状核酶，合成编码核酶的DNA并克隆到载体pSP72上，酶切及DNA测序鉴定核酶序列。结果 HIF-1α mRNA的72位含有GUC三联体，可以作为核酶的切割靶点，设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16nt的侧翼序列。计算机辅助预测证明此位点为合适的靶点，限制性内切酶和DNA测序证实核酶基因正确插入载体pSP72上。结论 成功设计并构建抗HIF-1α mRNA锤头状核酶基因表达载体，为进一步运用核酶切割HIF-1α mRNA基因，从而抑制肿瘤生长提供了必要条件。
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| 关 键 词： | 锤头状核酶 缺氧诱导因子1α HIF-1α 基因克隆 基因疗法 基因表达载体 肿瘤治疗 |
| 文章编号： | 1000-2065(2004)04-0301-04 |
Design of a hammerhead ribozyme targeting HIF-1αmRNA and cloning of its gene |
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| LI Ting,WU Yong-ping.Design of a hammerhead ribozyme targeting HIF-1αmRNA and cloning of its gene[J].Acta Academiae Medicinae Xuzhou,2004,24(4):301-304. |
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| Authors: | LI Ting WU Yong-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hammerhead ribozyme HIF-1 gene therapy |
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