慢性粒细胞白血病反义核酸基因治疗的实验研究 |
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引用本文: | 石奇珍.慢性粒细胞白血病反义核酸基因治疗的实验研究[J].福建医科大学学报,1998(3). |
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作者姓名: | 石奇珍 |
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作者单位: | 福建医科大学附属协和医院,福建省血液病研究所 |
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摘 要: | 目的单独应用bcr-abl反义硫代磷酸寡聚脱氧核糖核酸(ASPO)或c-mybASPO作用于慢性粒细胞白血病(CML)细胞的研究已有报道,但抑制的不彻底性是个主要问题。由于CML的发生是多癌基因协同作用及相互影响的结果,为进一步提高AS-PO对CML细胞的作用效果,用互补于两种类型(b2a2及b3a2)的bcr-abl基因融合位点两侧各13个核苷酸的ASPO(b2ASPO和b3ASPO)及c-myb基因起始密码子2-7互补的ASPO(mASPO)联合作用于K562细胞株和原代CML细胞。方法硫代磷酸寡核基酸(PS-ODN)的合成由392-05型DNA-RNA合成仪自动合成,经OPC柱纯化;细胞与PS-ODN共培养后24,48,96,120h倒置显微镜下活体观察,0.4%台盼蓝拒染法进行死活细胞计数;CFU-K562、CFU-GM、CFU-GEMM采用0.8%甲基纤维素半固体培养法;采用两对引物RT-PCR半定量法检测细胞bcr-ablmRNA表达;通过流式细胞仪检测及电镜观察细胞凋亡情况。结果(1)ASPO能够特异性抑制bcr-abl基因表达;经RT-PCR的检测发现10μmolASPO作用48h,两种反义
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关 键 词: | 反义寡核苷酸 基因治疗 bcr-abl基因 c-myb基因 慢性粒细胞白血病 |
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