应用RNA干扰技术沉默NF—κB基因对肺癌A549细胞的影响

目的：运用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术阻断肺癌细胞株A549中NF-κB p65基因表达，并研究该基因沉默后对细胞增殖的影响。方法：实验以肺癌A549细胞株为材料，分为空白对照、脂质体对照以及siRNA干扰实验共3组。以体外转录法合成dsRNA，并用脂质体转染A549细胞株，RT-PCR法测定肺癌A549细胞内NF-κBp65mRNA的表达。ELISA法检测NF—κB亚单位p65的DNA结合活性的改变。MTT检测细胞增殖情况。结果：与空白对照和脂质体对照组相比，SiR—NA组具有明显抑制肺癌A549细胞NF-κBp65mRNA表达的作用（P〈O．01），同时ELISA结果显示，siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于空白对照和脂质体对照组（P〈0．05）。MTT法显示siRNA组中细胞增殖减慢，生长受到抑制。结论：应用RNAi技术可以有效干扰肺癌A549细胞NF-κBp65的表达。