脾气虚证与肾气虚证大鼠小肠组织cAMP-PKA信号转导通路变化的比较研究

目的比较脾气虚证和肾气虚证大鼠回肠组织环磷酸腺苷-蛋白激酶(cAMP-PKA)信号转导通路的变化。方法将24只雄性SD大鼠随机分为正常组、脾气虚组、肾气虚组。脾气虚采用饱食1 d、禁食2 d、3 d为1个循环,并每日游泳至力竭,连续15 d;肾气虚采用腹腔注射卡那霉素,用药量250 mg/kg,分2次注射,用药14 d。造模后采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠回肠组织环磷酸腺苷(cAMP)活性,实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法(Western blot)检测蛋白激酶(PKA)、糖原磷酸化酶(GP)、磷酸化酶激酶(PHK)m RNA和蛋白的表达。结果与正常组比较,脾气虚组和肾气虚组大鼠的回肠组织cAMP含量均明显降低(P0.05或P0.01),在脾气虚组与肾气虚组之间,脾气虚组cAMP含量降低更多(P0.01)。与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织PKA m RNA和蛋白的表达明显减弱(P0.01),肾气虚组仅PKA蛋白表达有所下降(P0.05)。与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织PHK m RNA和蛋白的表达有明显减弱(P0.01),肾气虚组仅PHK蛋白表达有减弱(P0.05);并且在脾气虚组与肾气虚组之间,肾气虚组PHK m RNA表达高于脾气虚组(P0.05)。与正常组比较,脾气虚组大鼠回肠组织GP m RNA和蛋白的表达有显著减弱(P0.01),肾气虚组大鼠回肠组织GP m RNA表达下降(P0.01);并且在脾气虚组与肾气虚组之间,肾气虚组GP m RNA和蛋白表达高于脾气虚组(P0.01)。结论脾气虚证与肾气虚证大鼠回肠组织cAMP-PKA信号传导通路的变化存在差异,特别是在cAMP含量上,与正常组相比,由于脾气虚组较肾气虚组cAMP含量降低更多,推断脾气虚证出现乏力等低能量表现重于肾气虚组。