氯喹对百草枯攻毒后A549细胞存活率与蛋白表达的影响

目的分析氯喹(CQ)对百草枯(PQ)攻毒后A549细胞存活率与蛋白表达影响。方法 A549细胞生存率受PQ影响情况采用MTS法检测,依据不同PQ攻毒含量将其分成对照组、0.1μmol/L组、1μmol/L组、10μmol/L组、30μmol/L组、100μmol/L组、300μmol/L组和1 000μmol/L组,在攻毒12 h后进行检测;使用不同浓度CQ、自噬抑制剂、坏死抑制剂和抗炎反应药对攻毒A549细胞进行解救,Western-blot法检测攻毒后A549细胞内LAMP-2、LC-3及LAMP-1表达情况。结果攻毒12 h后,对照组A549细胞生存率为100%,0.1μmol/L组为98.5%,1μmol/L组为98.0%,10μmol/L组为96.8%,30μmol/L组为98.4%,100μmol/L组为65.5%,300μmol/L组为52.9%,1 000μmol/L组为46.3%。CQ干预:浓度为0.3μmol/L干预后生存率为68.2%、1μmol/L干预后为72.5%、3μmol/L干预后为78.4%、10μmol/L干预后为85.9%、30μmol/L干预后为95.7%。CQ解救浓度为30μmol/L,解救后A549细胞内LAMP-2、LC-3及LAMP-1蛋白表达量均显著升高,和攻毒后对比差异有统计学意义(P0.05)。结论 CQ可明显缓解PQ攻毒后A549细胞生存率,其作用机制和稳定发生溶酶体膜或者上调自噬反应有关。