| 诺如病毒遗传组I型TaqMan—MGB探针实时荧光RT-PCR的研究 |
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| 引用本文： | 谭翰清,郭赐贶,谭海芳,陈华,程洁萍,林凤,孔秀珍,丁丽娜.诺如病毒遗传组I型TaqMan—MGB探针实时荧光RT-PCR的研究[J].热带医学杂志,2008,8(10). |
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| 作者姓名： | 谭翰清 郭赐贶 谭海芳 陈华 程洁萍 林凤 孔秀珍 丁丽娜 |
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| 作者单位： | 广东省肇庆市疾病预防控制中心,肇庆,526020 |
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| 基金项目： | 广东省肇庆市科技创新计划 |
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| 摘 要： | 目的建立诺如病毒遗传组I型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏的检测方法,为疾病预防控制提供可靠的依据。方法根据GenBank诺如病毒遗传组Ⅰ型代表株保守序列设计特异引物对和TaqMan-MGB探针,建立一步法实时荧光RT-PCR快速检测反应体系,优化反应条件,评价反应体系的灵敏度、特异性、重复性,并与常规RT-PCR比较。结果诺如病毒遗传组Ⅰ型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR检测时限短,仅1h就出结果,与轮状病毒、腺病毒、星状病毒、甲肝病毒、诺如病毒遗传组Ⅱ型无交叉反应,最低检出下限为100拷贝/反应,比常规RT-PCR灵敏100倍,5份浓度不同的诺如病毒遗传组Ⅰ型标本重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为0.39%～1.02%。结论诺如病毒遗传组Ⅰ型TaqMan-MGB探针实时荧光RT-PCR快速、特异、灵敏、重复性好,可应用于突发公共卫生应急检测和诺如病毒遗传组Ⅰ型监测,提高快速检测能力。
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| 关 键 词： | 人类杯状病毒 诺如病毒 实时荧光PCR 逆转录PCR |
The Study for Genogroup Ⅰ of Norovirns Detection Using TaqMan-MGB Probe-Based Real-Time Fluorescent Reverse Translation Polymerase Chain Reaction |
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| TAN Han-qing,GUO Ci-kuang,TAN Hai-fang,CHEN Hua,CHENG Jie-ping,LIN Feng,KONG Xiu-zhen,DING Lina.The Study for Genogroup Ⅰ of Norovirns Detection Using TaqMan-MGB Probe-Based Real-Time Fluorescent Reverse Translation Polymerase Chain Reaction[J].Journal Of Tropical Medicine,2008,8(10). |
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| Authors: | TAN Han-qing GUO Ci-kuang TAN Hai-fang CHEN Hua CHENG Jie-ping LIN Feng KONG Xiu-zhen DING Lina |
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