| PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及在SW480细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 柳玉红,李建明,周军,丁彦青.PRL-3基因RNA干扰慢病毒载体的构建及在SW480细胞中的表达[J].南方医科大学学报,2008,28(4):509-512. |
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| 作者姓名： | 柳玉红 李建明 周军 丁彦青 |
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| 作者单位： | 南方医科大学南方医院病理科,南方医科大学基础医学院病理学教研室,广东省分子肿瘤病理重点实验室,教育部广东省共建人类重大疾病转录组学和蛋白组学重点实验室,广东,广州,510515 |
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| 摘 要： | 目的 构建PRL-3基因慢病毒干扰载体及建立PRL-3基因稳定干扰的结直肠癌细胞亚系.为PRb-3基因功能研究奠定基础.方法 设计PRL-3基因特异性RNAi靶序列,与pENTRTM/U6线性载体定向连接,构建pENTRTM/U6真核入门表达载体.通过与pENTRTM/U6 entry clone与pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST载体进行重组,获得pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体.利用包装细胞293FT获得重组的慢病毒,感染大肠癌细胞株SW480细胞,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰PRL-3基因的细胞亚系.结果 成功构建PRL-3 pLenti6/BLOCK-iTTM-DEST真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒悬液的滴度为6×105U/L.RT-PCR、Western blotting结果 表明,克隆1 PRL-3mRNA及蛋白显著降低.结论 成功构建人PRL-3基因特异性的慢病毒干扰载体,获得PRL-3基因稳定干扰的大肠癌细胞亚系.
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| 关 键 词： | RNA干扰 慢病毒 PRL-3 结直肠癌 基因 干扰 慢病 毒载体 细胞株 真核表达 cells expression stable gene RNA interference lentiviral vector 蛋白 克隆 Western blotting 滴度 悬液 结果 筛选 |
Construction of a lentiviral vector for RNA interference of PRL-3 gene and its stable expression in SW480 cells |
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| LIU Yu-hong,LI Jian-ming,ZHOU Jun,DING Yan-qing.Construction of a lentiviral vector for RNA interference of PRL-3 gene and its stable expression in SW480 cells[J].Journal of Southern Medical University,2008,28(4):509-512. |
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| Authors: | LIU Yu-hong LI Jian-ming ZHOU Jun DING Yan-qing |
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| Institution: | Department of Pathology and Guangdong Provincial Key Laboratory of Molecular Tumor Pathology, Nanfang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China. liuyuhongyantai@163.com |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference lentivirus PRL-3 colorectal carcinoma |
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