邻苯二甲酸二乙酯诱导的大鼠尿道下裂与Mafb的表达相关:基于转录组测序结果

目的通过转录组测序筛选大鼠尿道发育过程中相关差异基因，并进行验证；探究邻苯二甲酸二乙酯（DEHP）诱导SD大鼠 尿道下裂的发生机制。方法40只成年SD孕鼠随机分成4组（n=10），前两组予以空白对照处理，分别于妊娠期16 d（GD16组） 和GD19 d（GD19组）剖宫产取出雄性胎鼠，将收集好的胎鼠阴茎组织进行转录组测序，lllumina HiSeq 2000筛选出差异表达基 因（DEGs），然后对DEGs进行差异基因功能（GO）和pathway显著富集性分析；选取其中的DEG（Mafb）进行免疫荧光验证。后 两组分别予以玉米油（对照组）和DEHP 750 mg/(kg·d)]（DEHP暴露组）于GD12 d至GD19 d每日灌胃处理，GD19 d剖宫产取 出雄性胎鼠，并判断有无尿道下裂的发生。扫描电镜和HE染色观察阴茎组织形态学改变，免疫荧光和Western blot检验阴茎组 织中Mafb、β-catenin的表达水平。结果GD19组胎鼠阴茎组织与GD16组胎鼠阴茎组织转录组测序结果示1360个DEGs（其中 上调797个，下调563个），差异基因主要富集于细胞粘着斑信号通路、轴突导向信号通路、细胞外基质受体作用信号通路等，选 取DEG（Mafb）进行免疫荧光验证，发现Mafb的表达随发育显著增加，与测序结果相符。而DEHP暴露组胎鼠阴茎组织与对照 组胎鼠阴茎组织相比，Mafb、β-catenin表达水平显著下调（P<0.01）。结论随着大鼠阴茎组织的正常发育，Mafb的表达逐渐增 加；而DEHP暴露组较对照组Mafb、β-catenin表达显著下调，提示β-catenin信号通路影响Mafb表达可能与DEHP诱导大鼠尿道 下裂发生相关。