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成熟型Smac真核表达载体的构建及其在膀胱癌T24细胞中的表达
引用本文:汪良,曾甫清,陈方敏.成熟型Smac真核表达载体的构建及其在膀胱癌T24细胞中的表达[J].华中科技大学学报(医学版),2006,35(1):52-55.
作者姓名:汪良  曾甫清  陈方敏
作者单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院泌尿外科,武汉,430022
摘    要:目的 构建成熟型Smac基因真核表达载体.探讨成熟型Smac基因促进肿瘤细胞凋亡的可能性。方法 以Xba Ⅰ和Bam HⅠ双酶切质粒pET15b-Smac.回收酶切释放基因片断.定向插入以Xba Ⅰ和BamHⅠ双酶切的真核表达质粒pcDNA3.1(-)中.构建含有成熟型Smac基因的真核表达载体pcDNA-MT Smac.测序鉴定重组的质粒。构建的质粒转染膀胱癌T24细胞.在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导下以原位未端转移酶标记法(TUNEL)检测凋亡率。结果 以T7引物测序证实得组的质粒pcDNA-MT Smac含有成熟型Smac基因。空白对照组、50ng/ml TRAIL处理组、转染Smac组和转染Smac后50ng ml TRAIL处理组的凋亡率分别为1.6%、20.2%、1.7%和35.7%.未经TRAIL诱导.T24细胞及转染了成熟型Smac的T24细胞间凋亡率差异无显著性意义(P〉0.05).然而作TRAIL的诱导下.转染了成熟型Smac的T24细胞凋亡率明显高于术转染细胞.其差异有级显著性意义(P〈0.01)。结论 成功构建了含有成熟型Smac基因的真核表达载体.并证实该基因可以促进TRAIL诱导的膀胱癌T24细胞的凋亡.为研究成熟型Smac基因促进肿瘤细胞凋亡提供了实验依据。

关 键 词:基因  Smac  真核表达载体  细胞凋亡
修稿时间:2005年3月8日

Construction and Significance of Eukaryotic Expression Vector for Mature Smac Gene
Wang Liang,Zeng Fuqing,Chen Fangmin.Construction and Significance of Eukaryotic Expression Vector for Mature Smac Gene[J].Journal of Huazhong University of Science and Technology(Health Sciences),2006,35(1):52-55.
Authors:Wang Liang  Zeng Fuqing  Chen Fangmin
Abstract:
Keywords:gene  Smac  eukaryotic expression vector  apoptosis
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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