| 小鼠BTLA胞外段腺相关病毒载体的构建和表达 |
| |
| 引用本文： | 韩凌斐,王玲,邱伟民,姚红霞,胡程,卞政,马衣努尔·买提托合提,方勇,马丁. 小鼠BTLA胞外段腺相关病毒载体的构建和表达[J]. 华中科技大学学报(医学版), 2010, 39(2). DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2010.02.021 |
| |
| 作者姓名： | 韩凌斐 王玲 邱伟民 姚红霞 胡程 卞政 马衣努尔·买提托合提 方勇 马丁 |
| |
| 作者单位： | 1. 同济大学附属第一妇婴保健院,上海,200040
2. 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,武汉,430030 |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划资助项目，同济大学青年优秀人才培养行动计划资助项目 |
| |
| 摘 要： | 目的 构建小鼠B/T淋巴细胞弱化因子(BTLA)胞外段的腺相关病毒载体,并感染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO)进行真核表达.方法 从C57BL/6小鼠脾脏中提取总RNA,经RT-PCR 扩增BTLA 胞外段,然后将其克隆到腺相关病毒载体的骨架质粒中,构建重组骨架质粒psBTLA.重组质粒经双酶切鉴定及测序正确后,与pHELP质粒以及pRC质粒3质粒共转染293T细胞,收获含病毒的上清后用氯仿-PEG8000的方法进行纯化浓缩,再用浓缩后的病毒液感染CHO细胞,并用SDS-PAGE和Western blot检测BTLA胞外段的表达.结果 获得长度为502 bp的小鼠BTLA胞外段基因,经测序证实其序列正确.含有BTLA胞外段基因的腺相关病毒载体感染CHO细胞后,SDS-PAGE和Western blot分析证实感染的CHO细胞可表达出约21 kD的BTLA胞外段蛋白.结论 成功构建小鼠BTLA胞外段基因的腺相关病毒载体,并感染CHO细胞后表达出相应蛋白,为进一步研究BTLA胞外段的功能效应奠定实验基础.
|
| 关 键 词： | B/T淋巴细胞弱化因子 腺相关病毒 基因克隆 真核表达 |
Construction and Expression of Adeno-associated Virus Vector of Mouse Soluble BTLA |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
