摘 要: | 为探讨稳定过表达Smac基因对胃癌细胞凋亡的影响,采用脂质体介导Smac基因转染MKN45细胞,G418筛选阳性克隆。逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和Western印迹鉴定Smac表达,同时以丝裂霉素作为凋亡诱导因子,采用锥虫蓝活细胞拒染法检测癌细胞体外生长活性,透射电镜、吖啶橙溴化乙啶荧光染色法、末端TdT酶标记技术(TUNEL)观察癌细胞凋亡及比率;Western印迹、比色法检测细胞内Caspase3表达。结果显示:所获胃癌亚克隆细胞MKN45/Smac的SmacmRNA、蛋白表达水平均显著高于MKN45(P<0.01)。10μg/ml丝裂霉素作用6~24h后,与MKN45细胞比较,MK…
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