首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
检索        

B型流感病毒核衣壳蛋白ELISA捕获法的建立和临床应用2
引用本文:丘立文,廖志勇,王压娣,丁细霞,狄飚,袁国勇,车小燕.B型流感病毒核衣壳蛋白ELISA捕获法的建立和临床应用2[J].广东医学,2009,30(10).
作者姓名:丘立文  廖志勇  王压娣  丁细霞  狄飚  袁国勇  车小燕
作者单位:南方医科大学珠江医院医学检验中心
基金项目:广州市科技攻关莺点项目,广东省科技攻关项目 
摘    要:目的 制备和鉴定B型流感病毒核衣壳(N)蛋白单克隆抗体(mAb),建立双抗体夹心捕获抗原ELISA,用于B型流感病毒感染的早期诊断。方法 用重组B型流感病毒N蛋白和B型流感病毒抗原免疫BALB/c小鼠制备mAb,采用ELISA间接法、免疫荧光(IFA)和免疫印迹(WB)进行筛选和鉴定,通过竞争抑制试验分析抗体识别表位,并采用抗体配对试验建立双抗体夹心捕获抗原ELISA法检测B型流感病毒 N抗原。结果 获得12株特异性针对B型流感病毒 N蛋白的mAb,识别8个不同的抗原位点,根据mAb识别抗原表位,对mAb进行多种组合的配对试验,筛选出2株单抗BN4和BN8混合作为捕获抗体,辣根过氧化物酶标记的单抗BN1 和BN5混合作为测定抗体,建立了双抗体夹心ELISA法,测定新鲜的漱口液标本的灵敏度达100%,而对冻融的漱口液标本检测灵敏度为83.9%,与其他呼吸道病毒如A型流感病毒、副流感病毒等无交叉反应,特异度达100%。结论 获得特异性好的mAb,经过抗体的配对和优化,建立了一种灵敏度高、特异性强的B型流感病毒抗原的ELISA捕捉法,可用于B型流感病毒感染的早期实验室诊断及流行病学研究。

关 键 词:B型流感病毒  核衣壳蛋白  单克隆抗体  ELISA  

Development and application of monoclonal antibodies-based antigen capture ELISA for detecting nucleocapsid protein of Influenza B virus
QIU Li-wen,LIAO Zhi-yong,WANG Ya-di,DING Xin-xia,DI Biao,YUAN Guo-yong,CHE Xiao-yan.Clinical Laboratory Center,Zhujiang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou ,China.Development and application of monoclonal antibodies-based antigen capture ELISA for detecting nucleocapsid protein of Influenza B virus[J].Guangdong Medical Journal,2009,30(10).
Authors:QIU Li-wen  LIAO Zhi-yong  WANG Ya-di  DING Xin-xia  DI Biao  YUAN Guo-yong  CHE Xiao-yanClinical Laboratory Center  Zhujiang Hospital  Southern Medical University  Guangzhou  China
Institution:QIU Li-wen,LIAO Zhi-yong,WANG Ya-di,DING Xin-xia,DI Biao,YUAN Guo-yong,CHE Xiao-yan.Clinical Laboratory Center,Zhujiang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510282,China
Abstract:Objective To prepare and characterize monoclonal antibodies(mAbs) against nucleocapsid(N) protein of influenza B virus and to establish mAbs-based sandwich antigen capture ELISA for detecting N protein of influenza B virus.Methods BALB/c mice were immunized with purified recombinant N protein in combination with virus antigen of influenza B virus for producing mAbs.The identification of mAbs was performed using indirect enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA),indirect fluorescent-antibody assay(IFA),and We...
Keywords:ELISA
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
点击此处可从《广东医学》浏览原始摘要信息
点击此处可从《广东医学》下载免费的PDF全文
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号