一种新型脂肪变性 HepG2细胞模型及线粒体能量代谢障碍评价? |
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引用本文: | 张玉佩,孔怡琳,杨钦河,金玲,梁荫基,邓远军,李媛媛,程少冰.一种新型脂肪变性 HepG2细胞模型及线粒体能量代谢障碍评价?[J].广东医学,2016(6):804-807. |
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作者姓名: | 张玉佩 孔怡琳 杨钦河 金玲 梁荫基 邓远军 李媛媛 程少冰 |
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作者单位: | 1. 暨南大学医学院中医系 广州510632;2. 广东省中医院大学城院区放疗科 广州510006;3. 暨南大学附属第一医院中医科 广州510632 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(81302878;81273617),中国肝炎防治基金会天晴肝病研究基金科研课题(CFHPC20132184),广东省中医药局建设中医药强省科研项目(20152112 |
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摘 要: | 目的:探讨建立一种新型的脂肪变性HepG2细胞模型的方法,并对细胞线粒体能量代谢障碍程度进行评价。方法予25%的胎牛血清和0.1%的医用脂肪乳DMEM培养基初步诱导12 h后,进一步予油酸和棕榈酸组成的0.1 mmol/L游离脂肪酸( FFA) DMEM培养基再次诱导12 h,建立脂肪变性HepG2细胞模型,并以无血清DMEM培养基作为对照比较。诱导成功后,采用油红O染色观察细胞内脂滴沉积状况,并用全自动生化仪检测细胞上清液丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶含量和细胞内三酰甘油( TG)含量;采用流式细胞仪测定细胞内活性氧( ROS)和线粒体膜电位的变化,采用磷钼酸比色法测定细胞内三磷酸腺苷( ATP)含量,综合评测脂肪变性细胞线粒体能量代谢障碍的程度。结果与对照组比较,模型组细胞内橘红色脂滴大量形成,且TG和ROS含量明显增高(P<0.01),而线粒体膜电位及细胞内ATP含量显著降低(P<0.01)。结论采用25%胎牛血清、0.1%中/长链脂肪乳和0.1 mmol/L FFA分阶段诱导HepG2细胞,可以成功在体外建立脂肪变性细胞模型,该模型会引起细胞线粒体能量代谢紊乱,与非酒精性脂肪性肝病临床发病机制存在相似性。
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关 键 词: | HepG2细胞 脂肪变性 活性氧 线粒体膜电位 能量代谢 |
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