siRNA抑制STAT3基因对人乳腺癌细胞的影响

摘要]　目的　应用RNAi干扰技术沉默MCF-7乳腺癌细胞信号转导及转录活化因子3 (STAT3)，观察乳腺癌细胞生长及凋亡情况。方法　采用MTT法观察不同浓度的重组质粒（A组：0.1 μg/mL psilencer3.0-H1-STAT3-siRNA重组质粒转染组、B组：0.2 μg/mL psilencer3.0-H1-STAT3-siRNA重组质粒转染组、C组：0.3 μg/mL psilencer3.0-H1-STAT3-siRNA重组质粒）转染MCF-7乳腺癌细胞株后对乳腺癌细胞生长抑制作用的情况；采用半定量RT-PCR法，检测重组质粒对STAT3基因表达的影响；吖啶橙染色、流式细胞术观察细胞凋亡。结果　A、B、C三组的重组质粒对乳腺癌MCF-7细胞株有抑制作用，三组的生长抑制率48 h分别为27.17%、40.21%、26.08%，72 h分别为41.30%、65.21%、42.39%；48 h、72 h生长抑制率与空白组、空质粒对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)；在不同浓度的重组质粒组，STAT3 mRNA表达均下降，与空白组、空质粒对照组比较，差异有统计学意义(P<0.01)，其中以B组表达下降更明显；吖啶橙染色结果空白组及阴性组细胞呈绿色或黄绿色荧光，实验组细胞可见较多黄色荧光，偶见红色荧光, 提示实验组细胞较多呈早中期凋亡。细胞周期分析显示重组质粒组细胞出现G0-G1期阻滞，且B组(0.2 μg/mL )细胞凋亡最明显。结论 STAT3 siRNA可以下调MCF-7乳腺癌细胞STAT3 mRNA的表达水平，抑制MCF-7细胞的生长。

Effects of STAT3 silence by siRNA on the human breast cancer cell MCF-7